1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述

脂肪酶的研究已有一百多年历史。在20世纪70年代人们把催化长链脂肪酸酯水解或油酸酯类水解的酶类定义为脂肪酶。脂肪酶(lipase e. c. 3. 1. 1. 3) 亦称酰基甘油水解酶,广泛存在于原核生物 (如细菌) 和真核生物(如霉菌、哺乳动物、植物等) 中。脂肪酶的天然底物是甘油酯类,然而研究表明,脂肪酶不仅能催化油脂水解^[1],生产各种脂肪酸、甘油和甘油单酯或二酯；而且在有机相中还能催化酯合成^[2]和酯交换反应^[3],生产医药、化工、食品和化妆品的重要原料,其中有些产品是用化学方法难以得到的, 而在常温、常压下, 酶催化却能一举成功。因此,脂肪酶在油脂加工和有机合成中显示了巨大的应用潜力^[4-9]。它以其来源广,催化功能多的优势, 已成为应用酶中的一枝新秀。

脂肪酶多功能催化作用的开发必须以脂肪酶的底物特异性为基础。脂肪酸特异性是指酶对不同(碳链长度和饱和度) 的脂肪酸所表现出的特殊反应性不同来源的脂肪酶水解甘油三酯的脂肪酸特异性有很大差异，同时这些酶对底物中不饱和脂肪酸的双键位置也呈现不同反应性。位置特异性是指酶对底物甘油三酯中sn-1（或3）和sn-2位酯键的识别和水解的反应性。立体特异性一般是指酶对底物甘油三酯中立体对映结构的1位和3位酯键的识别和选择性水解，在有机相中酶促酯合成和酯交换时，酶对底物的不同立体结构也表现出立体特异性。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

本课题通过在纳米金溶液中直接加入吐温80,即作为纳米金的稳定剂又充当脂肪酶的水解底物。当体系中加入脂肪酶，在其催化水解下利用紫外分光光度法对吸光度的测定来进行脂肪酶活性的测定。通过对盐浓度，温度，ph三个条件的优化，在最佳条件下测得脂肪酶活性的动力学与之前本课题组做的吐温60为底物的动力学进行比较，研究脂肪酶对链长相同但饱和度不同的脂肪酸的水解活性特异性及其机理，最终验证课题组之前建立的纳米传感方法对测定脂肪酶特异性的实用性。

（1）用吐温80做底物，以纳米金的显色反应,利用紫外分光光度计确定脂肪酶活性的最佳盐浓度，最适温度和最适ph等。

（2）通过与之前吐温60为底物的实验比较，研究脂肪酶对链长相同但饱和度不同的脂肪酸的水解活性特异性及其机理。