柱前衍生法测定食品中的聚糖文献综述
2020-04-15 21:01:13
1.1 寡糖概述
寡糖(OS)是通常由2-20个单体通过各种O-糖苷键连接组成的碳水化合物。构成寡糖的单糖结构单元主要是五碳糖和六碳糖,基本上由六种单糖所组成,即葡萄糖(glu-cose)、果糖(fructose)、半乳糖(galactose)、木糖(xylose)、阿拉伯糖(arabinose)和甘露糖(man-nose)等。[1,4]
寡糖由于其具有高选择益生元活性成为了新兴研究的目标,益生元是不能被人类消化酶消化的膳食成分,但它们通过选择性地刺激一种或有限数量的宿主肠道微生物群的生长而为宿主提供健康益处。[2]其益生元活性主要体现在其在免疫调节、降低血糖、增强造血功能和保护胃肠道等方面。[4,11,12,13]
本研究基于对常见食品中不同种类寡糖进行定性定量分析,进一步探究不同种类寡糖的生物学活性。天然植物中的寡糖含量较低,因此需要通过采取一些有效的提取分离和富集措施才能进行进一步研究。
J.Ekvall等[5]在对豌豆中棉子糖族寡糖的提取工艺作了详细研究,结果发现,50%的乙醇在室温下浸提30 min后得到的产量最多,沸点提取虽然速度较快,但损失的糖也多,平均达1/3。Helle NygaardJohansen等[6]详细分析了提取液中甲醇和乙醇的浓度和温度对棉子糖族寡糖的提取率的影响,经过对豆类、棉葵类等植物种子中寡糖提取的研究,发现用80%浓度乙醇的水溶液作提取液时,温度影响较大,纯水和50%浓度的乙醇溶液受温度影响很小。王川等[7]在对胡萝卜寡糖的研究中发现,先用乙醇和沸甲醇抽提单糖,再用甲醇抽提寡糖,其寡糖的提取率和纯度都较高。
1.2 固相萃取技术
其中,固相萃取(Solid phase extraction,SPE)是19世纪70年代后期由液—固萃取与柱液相色谱相结合发展来的新型样品处理术。与传统的液—液萃取方法相比,固相萃取具有快速高效、有机溶剂用量少、无相分离操作、样品处理通量高、无乳化现象等优点,且该技术操作简单,易于实现自动化。目前该技术已广泛用于环境检测与分析中,且被许多行业颁布为样品前处理标准方法。
固相萃取的基本原理与液相色谱类似:它是依据被萃取组分与样品基质及其他组分在固定相上作用力强弱的不同而彼此分离,随后采用少量选择性洗脱剂洗脱,达到富集与纯化目标物的目的。吸附剂的种类、分离模式等的选择将影响方法的有效性。为获得广泛的应用范围、较高的灵敏度与选择性,研究者们进行了一系列探索,新型固相萃取技术在不同领域内得到了开发与应用。[3]其进行步骤和过程如图1。
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