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腺苷蛋氨酸高产菌株选育与发酵过程优化毕业论文

 2022-03-31 20:59:25  

论文总字数:15922字

摘 要

ABSTRACT Ⅱ

第一章 文献综述 3

1.1酿酒酵母概况 3

1.1.1酿酒酵母的形态特征 3

1.1.2酿酒酵母的理化性质 3

1.2腺苷蛋氨酸概况 3

1.2.1 腺苷蛋氨酸的物理性质 3

1.2.2 腺苷蛋氨酸的化学性质 4

1.2.3 腺苷蛋氨酸的的应用前景 5

1.2.4 制备腺苷蛋氨酸的方法 6

1.3微生物发酵法 8

1.3.1培养条件 8

1.3.2培养基 8

1.4 研究内容 8

第二章 实验材料与方法 9

2.1 实验材料及配方 9

2.1.1 实验器材 9

2.1.2. 发酵液配方 10

2.1.3. 种子液配方 10

2.1.4 实验菌株 10

2.2 培养基及溶液配制 10

2.2.2 YPD平板的配制 10

2.2.2 种子液的配制 10

2.2.3 发酵液的配制 11

2.3 实验步骤 12

2.3.1实验方法 12

2.3.2分析方法 13

第三章 实验结果和讨论 16

3.1 发酵条件的优化 16

3.1.1装液量对腺苷蛋氨酸的产率的影响 16

3.1.2摇床的转速对于腺苷蛋氨酸产量的影响 17

3.1.3 温度对腺苷蛋氨酸产量的影响 18

3.1.4 pH对腺苷蛋氨酸产量的影响 19

3.2 培养基的优化 20

3.2.1碳源的影响 20

3.2.2金属离子的影响 21

第四章 结论与展望 22

4.1 结论 22

4.2 展望 22

参考文献 24

致 谢 26

摘要

酿酒酵母具有真核结构,是用于制作面包馒头的一种与人类关系最密切应用广泛的真菌,它的转基因菌株可用于酿制啤酒等酒类产品。

腺苷蛋氨酸是一种广泛存在于人体及动物体内的天然物质,主要在肝脏中产生,并且是多种甲基转移酶催化反应的甲基供体。目前该物质逐渐在医药领域应用得到推广,比如关节炎等病症。随着研究的进一步深入,腺苷蛋氨酸在治疗肝病、抑郁症等方面有良好的表现。

在实际的发酵过程中,发酵液的酸碱度和培养条件都会影响目标产物的产量,因此本实验主要通过对于单因素条件的改变对发酵液中菌株浓度的影响进行研究,从而得出各条件下的OD值及实验的适宜的培养条件。

本实验主要研究摇床转速、培养温度、发酵液pH、装液量对于摇瓶发酵产量的影响。并对实验进行数据记录、结果分析以及实验过程的优化。

关键词:腺苷蛋氨酸 酿酒酵母

Screening of High Yield Strain of SAM and Optimization of Fermentation

ABSTRACT

Saccharomyces cerevisiae is a eukaryotic structure can be used for most applications making bread buns close a relationship with human beings most widely fungi, its transgenic strains can be used in brewing beer and other alcoholic products.

SAM is a widely present in human and animal natural substances, mainly produced in the liver, and a variety of methyltransferase enzyme-catalyzed reaction of methyl donor. At present, the material gradually be promoted in the medical field applications, such as arthritis and other diseases. With further research, SAM has a good performance in the treatment of liver disease, with deep depression.

In the actual fermentation process, the pH of the fermentation broth and culture conditions will affect the yield of the target product, so for this experiment by changing the single factor influence broth strain concentration on research, so as to arrive under each condition suitable culture conditions OD values and experiment.

This experiment studies rotation speed, temperature, broth PH, liquid volume for fermentation yield. The experimental data recording, analysis and optimization of the results of the experiment.

Key words: S-Adenosylmethionine ;Adenosine kinase ;Methionine biosynthesis pathway ;Saccharomyces Cerevisiae

第一章 文献综述

1.1酿酒酵母概况

1.1.1酿酒酵母的形态特征

酿酒酵母是单体具有球形、卵圆形、柱状、等形状的细胞直径2-6微米不等长度5-30微米不等的单细胞微生物[1]

大多数酵母菌的菌落特征与细菌相似,颜色多为乳白色且菌落表面光滑 质地均匀。颜色均一。但比细菌菌落大而厚,菌落表面平滑。

1.1.2酿酒酵母的理化性质

酿酒酵母可以作为食用酵母、药用酵母以及作为动物的饲料酵母[2],因为这种菌的维生素和蛋白质含量较高。酿酒酵母也是实验室培养基中使用频率较高的成分酵母提取物的主要的原料[3]。酿酒酵母具有较强的腺苷蛋氨酸胞内积累能力[4],它是当前工业生产所需要的主要菌种之一。

1.2腺苷蛋氨酸概况

1.2.1 腺苷蛋氨酸的物理性质

腺苷蛋氨酸又称为S-腺苷甲硫氨酸,它的相对分子质量为398.44,分子式为 C15H22N6O5S的一种甲硫氨酸的一种活性表现形式[5],这种物质在动植物体内都存在,其结晶体是白色结晶粉末,腺苷蛋氨酸很容易溶于纯水中,在甲醇、乙醇中只能溶解少量,在乙醚、丁酮中不能溶解。

图1-1 腺苷蛋氨酸分子构型图

1.2.2 腺苷蛋氨酸的化学性质

腺苷蛋氨酸是双手性物质,2 种异构体中只有(S,S)-腺苷蛋氨酸 具有生物活性。在生物体内,腺苷蛋氨酸是由 L-蛋氨酸(L-Met)和三磷酸腺苷(ATP)经腺苷蛋氨酸SAM合成酶(又名蛋氨酸腺苷转移酶)催化合成[6]。腺苷蛋氨酸的功能在在绝大部分取决于分子结构中的具有活性的甲基集团以及那个高能的硫原子。就合成反应而言,ATP 分子中的腺苷移动到 Met 上通过反应从而形成高能硫,从而使和它相连的碳活化因而使该原子有转甲基、转氨丙基、转硫基的作用。

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