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高分辨率质谱用于银杏生物活性物质研究文献综述

 2020-04-25 20:23:40  

1.目的及意义

银杏是我国古老的树种,是世界上最古老的珍稀树种之一。地球生命历经千亿年的变动,尤其是第四世纪冰川覆盖之后,只有银杏仍保持它最原始的面貌,在生物演化学史上被称为“活化石”。其叶、果实、种子均有较高的药用价值,其药理作用不断被认识,临床应用范围逐步扩大,具有很好的应用前景。银杏叶性甘,味苦、涩、平,归心、肺 经。有敛肺,平喘,活血化瘀,止痛之功。中医主要用于治疗肺虚咳嗽、冠心病、心绞痛、高脂血症等。银杏叶提取物 ( Ginkgo biloba extract, GBE) 是从银杏的干燥叶中提取的具有多种有效药用成分的混合物,是目前临床使用较广泛的中药材之一,药理研究结果显示,GBE中含有黄酮类、萜类内酯、有机酸、聚异戊烯醇类、甾体化合物、氨基酸、微量元素等在内的 100 多种化学成分。GBE 中最主要的活性成分为银杏黄酮和银杏内酯类化合物。虽然银杏作为药用至今已有600多年的历史,我们的祖先很早就将其用于人类防病治病和保健方面,然而真正对其进行药理及其他方面的研究始于70年代,近10多年来国内外的研究进展更为迅速。

随着现代科技的发展,药质量和安全问题直接关系到中医药的发展,越来越受到各界的广泛重视,因此科学、有效的质量标准则是保证其临床用药有效性、安全性和稳定性的关键准绳,且大多数是采用 HPLC 方法建立的,分析时间较长、灵敏度较差、准确度 较低,不利于中药实现科学化、现代化和国际化的战略目标。质谱技术已经发展成为中药各类化学成分分析的一种重要手段高分辨质谱借助超高的分辨率,可以准确地测得杂质精确的质荷比,进而计算出杂质的元素组成,并能区分复杂背景中质量数接近的杂质及共流出组分,可以不经复杂的分离和纯化步骤即可获得样品的色谱和质谱信息,通过一些相同的中性碎片或形成一些相同的特征离子,推导其裂解规律,为解析化合物的结构提供直接证据,是一种可以针对目标或非目标药杂质研究的有力工具,在药物质量研究领域得到越来越多的应用。

目前,银杏中主要生物活性物质的测定方法主要有紫外可见分光光度法(UV)、气相色谱法(GC)、液相色谱法(LC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)和液相色谱-串联质谱法等。紫外可见分光光度法操作简单,所需仪器易得,但准确性差,易产生假阳性; 气相色谱法具有较高的选择性,但操作步骤繁琐,样品需要衍生,分析时间较长; 液相色谱法需采用有机溶剂将待测物萃取后再进行分析,在某种程度上可以去除干扰组分,但操作耗时,无法满足痕量分析的要求。液相色谱-质谱法在食品检测中应用较普遍,已有文献报道利用超高效液相色谱-串联质谱建立了银杏中生物活性物质的测定方法,但将高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨率质谱用于银杏中不同部位的生物活性物质种类的比较测定尚未见报道。

四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(Q/orbitrap)将四极杆质谱和静电场轨道阱高分辨质谱串联,具有高质量分辨率、高灵敏度、抗干扰能力强,能够检测复杂混合物中更多痕量级物质的特点,广泛应用于农药、药物、活性物质、致癌物质等的分析,本实验拟采用钠升级高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法对银杏叶、银杏果和银杏外种皮通过几种溶剂提取后的主要生物活性种类进行分析,希望为研究银杏各部位中的化学物质成分提供参考,同时为进一步提高中药制剂的质量控制方法奠定了科学基础。

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2. 研究的基本内容与方案

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本课题的研究(设计)的目标:

(1)探讨银杏叶、银杏果和银杏外种皮提取物中化学成分的不同,确定差异成分;

(2)探讨不同溶剂提取方法分别对银杏叶、银杏果和银杏外种皮提取物中化学成分的影响。

本课题的研究(设计)的基本内容:

(1)探讨同种溶剂提取对银杏叶、银杏果和银杏外种皮提取物中的化学成分的影响;

(2)探讨不同溶剂提取分别对相同物质提取物中的化学成分的影响;

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