基于表面活性剂和姜黄素构建一个检测脂肪酶酶活的传感器文献综述
2020-04-13 13:25:16
一、引言:
脂肪酶广泛的存在于原核生物(如细菌[1])和真核生物(如霉菌[2]、哺乳动物[3]、植物[4]等)中, 它可将脂肪分解成甘油、脂肪酸和甘油单酯或二酯, 是一类特殊的酯键水解酶。它的一个特点是只能作用在异相或有机相中作用。脂肪酶不仅能催化脂类水解,还能催化酯交换及合成等, 反应不需要辅酶反应条件温和, 副产物少[5]。脂肪酶具有立体专一性和位置专一性。可利用脂肪酶的底物特异性(脂肪酸特异性、位置特异性、立体特异性)来提高水解能力、识别水解位置增加立体选择性等。脂肪酶虽然存在广泛但是由于微生物脂肪酶资源广, 生产条件不受外界条件的影响, 生产周期短, 成本低等特点, 使得微生物脂肪酶可被用于工业生产及应用。脂肪酶在食品、医药、日化制品、环保材料、生物化工等方面有着广泛的应用。可用于油脂的改性[10],制备化工产品和试剂,作为洗涤添加剂和废水处理添加剂,催化合成生物柴油[11]等。不同方面的应用对脂肪酶的活性及结构有着不同的要求。因此发展了很多测定脂肪酶活性的方法。 测定脂肪酶的方法可分三类: (1) 通过测定底物的减少来度量酶活的大小; (2) 测定产物增加判断酶活的大小; (3) 其他方法。
二、几种测定脂肪酶酶活的方法:
(一)、橄榄油乳化法测定脂肪酶酶活
橄榄油价格便宜、易得,因此是最常用的底物。用橄榄油为底物,有乳化法和直接测定法。对橄榄油进行乳化可以提高酶与底物作用的表面积,乳化法检测结果的重复性明显高于不乳化的直接法。因此,乳化橄榄油作为底物是脂肪酶活力检测的典型方法。在以橄榄油为底物的脂肪酶酶活检测方法中,主要是通过检测脂肪酸的生成速度来测定酶活。
橄榄油乳化法[14,15]是测定脂肪酶活性的常用方法,其测定的原理是天然油脂被水解产生的游离脂肪酸可以被氢氧化钠中和,根据消耗氢氧化钠的量间接测定脂肪酶的活力。
1、酶活计算公式
酶活力(U)=氢氧化钠消耗量(m/h)/反映时间(min)#215;M#215;n
式中,M为1 mL 氢氧化钠标准液所含的微克分子数;n为稀释倍数。
2、实验结果
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