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处于生长期的银杏叶中黄酮、酚酸和自由基含量的分析

摘要

通过Christ-Muller方法、HPLC和EPR精确测量处于生长期的银杏叶中的黄酮、酚酸和自由基的含量，并讨论了这些参数之间的联系。

关键词：银杏，黄酮，酚酸，自由基.

八月收集的银杏叶作为制药工作（1）。银杏叶中的标准提取物为许多制药准备工作（2）提供了基础。

银杏提取物能够改善大脑及周围组织的血液循环，特别是在较低处的肢体能够保护像眩晕或短期失忆这样的神经系统并且延缓机体衰老。银杏叶中的生物活动（3-8）主要和黄酮类物质的出现有关，例如单黄酮、配糖以及黄酮醇苷、双黄酮、花青素、儿茶素（2，5，9-16）这样的黄酮类物质，还有像银杏内酯和白果内酯（2，3，5，17-18）这样的萜内酯。有一组很重要的成分是银杏酚酸，比如苯甲酸和肉桂酸的衍生物和漆树酸（3，5，6，19-23）。

除了上面描述的生物活动，银杏中的活性成分也起到了清除自由基（4,24-26）的作用.光合作用发生在植物叶片中，有机成分在这里合成，它使用叶绿素Ⅱ吸收太阳能，伴随着氧气的释放。这个过程的机理包括多步单电子转移，所以它和自由基（27）的形成紧密相关。

自由基也可能是通过其他途径产生，比如光分解、热分解、氧化和链式反应（27），除此之外也通过血液中的含铜成分。

这篇文章报道了从六月到十月黄酮含量的变化（双黄酮除外），所有确定的银杏酸（19，20，23），以及植物的营养循环中水解生成的自由基。

双黄酮不包括在研究中，因为这些成分（9，15，16，29）并不和银杏酸结合（在银杏叶中和黄酮类似的结合会发生），事实上这对银杏酸-黄酮富集含量的变化没有影响。

这项工作的下一个目的是分析材料（30，32）中抗氧化剂和自由基清除剂含量变化的联系，以及相关的自由基的含量。此外，铜离子的含量已经被检测以便分析对自由基（28）产生过程的影响。至于叶子收获方面，由于研究在下一个营养循环开展，所以被规定在八月到九月。

实验

植物材料

银杏叶取自生长在Poznan的A·Mickiewicz大学中的银杏树。收获的时间见表1.这些叶子干燥后在室温下贮存。在叶子取样检测之前先进行粉碎并过0.5mm筛。

黄酮的检测

黄酮含量的检测是通过Christ-Muller法（33）使用Specol S-11仪器（Carl Zeiss Jena）在425 nm的条件下转化成槲皮素。结果见表2.

银杏酸的检测

银杏酸通过标准途径（19，23，34-36）分离并水解。和银杏酸一起蒸出的馏分通过水解将其分解，这些从银杏叶样品中得到的组分通过TLC进行分析（19，23）。结果作为定量测定的提示。整个银杏酚酸类物质有儿茶，p-间羟基苯甲酸，香草素，异香素，咖啡因，p-香豆素，阿魏酸和突触酸，水解后用HPLC检测。银杏叶中的微量不明银杏酚酸（20，23）在检测中被忽略了。

自由基的调查

自由基的研究是使用一台射电光谱仪在9.341 GHz下工作使用EPR方法进行的。银杏叶样品放在内径5 mm的石英管内。每个样品的自由基都被转化成EPR信号记录下来作为吸收曲线的一阶导数。EPR曲线通过梯度，线性关系，分裂因子的值和EPR信号（37-39）的强度。结果见表3.八月份收集的叶子的EPR信号的记录见图1.

铜离子的研究

矿物盐中所含的铜离子积累在银杏叶中，用上面测定自由基类似的方法来测定。结果见表4.

结果和讨论

从营养循环期间收集的银杏叶中得到的结果可以从两个层面考虑：

-黄酮含量的变化，银杏酚酸的测定，以及水解后自由基的浓度。

-以上成分之间的关系。

表2中描绘的结果是关于试样1-5中黄酮含量的变化，显示这些与八月的叶子相比其中的含量增加了40%，六月的叶子与十月相比减少了35.2%。后者在这个阶段的研究中是黄酮含量最低的。另一方面，黄叶子在营养循环（6，9，29，40）期间的叶子中有最高含量的双黄酮。

八月叶子中黄酮浓度最高证明了制药企业收割银杏叶的正确时间，制药企业已经规定了包括萜内酯（2）在内的这些成分在银杏叶制剂中的含量。

表2显示了酸性或碱性水解后银杏叶（19，20，23）中所有银杏酚酸含量的变化。在样品5中找到了最高浓度的游离银杏酚酸，在样品3中找到了最高浓度的结合酸。水解后，样品3中的游离银杏酚酸占银杏酚酸的比例为1：6