论文总字数：22759字

摘 要

本论文建立了一种简单灵敏的高效液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法用来测定比格犬血浆中的奥洛他定的浓度并研究其在比格犬体内的药代动力学行为。以琥珀酸美托洛尔为内标，采用梯度流速洗脱的方式，以乙腈-水（1‰乙酸，2mM的乙酸铵）=38：62（v/v）为流动相，采用正离子模式全扫描，血浆经酸化后，用乙酸乙酯萃取，经真空浓缩后复溶进样。奥洛他定的检测离子对为m/z338→247，内标的检测离子对为m/z268.5→116。该方法的奥洛他定的线性浓度范围为0.2-80ng/ml(R=0.9994)。最低检测浓度为0.2ng·mL^-1批内和批间精密度RSD均小于15%，准确度在-5.273%～-2.117%，提取回收率大于59%，待测药基质效应在88.0%~112.7%之间，内标基质效应为107.6%±0.03543。健康比格犬鼻腔喷入盐酸奥洛他定喷雾剂后，血浆奥洛他定的T_1/2为2.496±0.7760h，C_max为51.47±7.439 ng/mL，T_max为0.5555±0.1640h，AUC_0-t为134.2±34.59 ng/mL·h，AUC_0-∞为134.6±34.55ng/mL·h。该方法可以准确、快速、灵敏地测定血浆中奥洛他定的浓度，并成功用于适用于临床前药物代谢动力学的研究。

关键词：奥洛他定 LC-MS/MS 药代动力学

ABSTRACT

A simple and sensitive high-performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method was developed and validated to determine Olopatadine in beagle plasma.Metoprolol succinate as internal standard.,using the way of gradient elution,acetonitrile - water (1 ‰ acetate, 2mM ammonium acetate) = 38: 62 (v / v) as the mobile phase,with positive ion mode scanning,and after plasma acidification,extracted with ethyl acetate,and re-dissolve the sample which has been concentrated by vacuum.The transition monitored were m/z 338→247 for olopatadine and m/z 268.5→116.0 for IS，respectively. The method was linear over the concentration range of 0.2–80 ng/mL for olopatadine. The intra-day and inter-day assay variations were 15lt;%， and the accuracy values were between -2.117% and -5.273% relative error. The extraction recovery of olopatadine was more than 59%， and the relative matrix effect ranges from 88.0% to 112.7%. After healthy beagles’nasal has been injected into olopatadine hydrochloride spray,the Olopatadine’s T_1/2 is 2.496±0.7760h，C_max is 51.47±7.439 ng/mL，T_max is 0.5555±0.1640h，AUC_0-t is 134.2±34.59 ng/mL·h，AUC_0-∞ is 134.6±34.55ng/mL·h. The method can be accurate, rapid and sensitive determination of plasma concentration of olopatadine, and successfully used in preclinical studies of metabolic kinetics of the drug suitable.

Keywords:Olopatadine ;LC–MS/MS ;Pharmacokinetic

目 录

摘要 I

Abstract II

第一章 文献综述 1

1.1 盐酸奥洛他定的药理作用及药效作用 1

1.1.1药理作用 1

1.1.2 适应症 2

1.2 奥洛他定鼻喷雾剂 2

1.2.1 鼻喷雾剂简介 2

1.2.2 盐酸奥洛他定鼻喷雾剂 3

1.3 盐酸奥洛他定药代动力学研究概况 3

1.4 奥洛他定分析方法研究进展 3

1.5 总结 4

第二章 材料与方法 5

2.1材料与仪器 5

2.1.1 实验动物 5

2.1.2 试验药物 5

保存条件：避光，密封保存。 5

2.1.3主要仪器 5

2.2 LC-MS/MS分析条件 6

2.2.1色谱条件 6

2.2.2质谱条件 6

2.3美奥洛他定与内标的对照品溶液配制 8

2.4血浆样品的处理 8

2.5方法学验证 8

2.5.1方法特异性 8

2.5.2血浆中奥洛他定标准曲线的制备及定量下限的测定 8

2.5.3精密度与准确度试验 9

2.5.4提取回收率与基质效应试验 9

2.5.5进样残留实验 10

2.5.6稳定性考察 10

2.6动物实验 10

2.7 数据处理及统计分析 11

第三章 结果与讨论 12

3.1方法学验证 12

3.1.1方法特异性 12

3.1.2血浆中奥洛他定标准曲线的制备及定量下限的测定 14

3.1.3精密度与准确度试验 15

3.1.4 提取回收率与基质效应试验 16

3.1.5 进样针残留实验 19

3.1.6稳定性考察 20

3.2 比格犬药代动力学实验结果 21

第四章 结论 23

参考文献 25

致谢 27

第一章 文献综述

盐酸奥洛他定是一种具有两性化合物结构特点的抗过敏药。该药对组胺H1受体具有选择性高、疗效强的拮抗作用,并对白三烯，血栓素、血小板活化因子等过敏性化学介质的产生和释放显示出抑制作用,对速激肽释放和嗜酸性粒细胞浸润也有抑制作用。组胺H1受体拮抗剂以其对细胞上组胺受体位点的可逆性竞争作用而阻止组胺作用于靶细胞，通过阻滞和拮抗H1受体而发挥抗过敏作用，以达到防止一系列生理反应的发生。

盐酸奥洛他定是其盐酸盐，为白色或类白色粉末，盐酸奥洛他定主要用于过敏性鼻炎，荨麻疹，伴有瘙痒的皮肤病（湿疹、皮炎、寻常性银屑病、多形渗出性红斑）的治疗，尤其对常年过敏性鼻炎的治疗效果显著。

请支付后下载全文，论文总字数：22759字