高效液相色谱法测定盐酸厄洛替尼片

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography HPLC）又称”高压液相色谱”、”高速液相色谱”、”高分离度液相色谱”、”近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术【1】。盐酸厄洛替尼（Erlotinib hydrochloride）是近年上市的治疗晚期非小细胞肺癌药，是一种分子靶向治疗药，通过抑制人体细胞内表皮生长因子上一种特定酶的活性而达到抗肿瘤作用，能有效提高患者的带瘤生存率【2】。已有文献报道采用高效液相色谱（HPLC）测定其含量的方法，但该法为流动相等度洗脱法，不能分离出杂质。故笔者建立了流动相梯度洗脱测定盐酸厄洛替尼片剂含量的 HPLC 法，结果表明，建立的方法操作简便、结果准确，可用于该制剂中厄洛替尼的定量分析【3-4】。

一、高效液相色谱法

1、高效液相色谱法原理【5】

高效液相色谱法分为几种类型，分别是：吸附色谱法、分配色谱法、离子色谱法、凝胶色谱法、亲和色谱法等。

液-液分配：即化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)　流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液流失），有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱，溶质在两相间进行分配。

液-固分配：流动相为液体，固定相为吸附剂（如硅胶、氧化铝等）。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是：当试样进入色谱柱时，溶质分子 和溶剂分子对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附。

离子交换色谱：IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换，依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。

离子对色谱：离子对色谱法是将一种 ( 或多种 ) 与溶质分子电荷相反的离子 ( 称为对离子或反离子 ) 加到流动相或固定相中，使其与溶质离子结合形成疏水型离子对化合物，从而控制溶质离子的保留行为。

空间排阻色谱：空间排阻色谱法以凝胶为固定相。它类似于分子筛的作用，但凝胶的孔径比分子筛要大得多，一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离，而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。