论文总字数：17936字

摘 要

随着生活质量的逐渐提高，健康意识的加强，对食品的品质人们提出了更高的要求，更加关心食品的食用安全性。卫生部公布了151种非食用物质，乌洛托品是其中之一，在弱酸条件下，乌洛托品分解产生甲醛，具有杀菌、防腐的作用和一定的致癌作用。然而，相应的检测方法和检测标准仍然缺乏，因此，开展腐竹、米线等食品中乌洛托品残留控制的检测是非常重要的。

本论文的目的就是通过高效液相色谱-串联质谱分析方法测定腐竹中的乌洛托品。用乙腈来提取被粉碎后的样品，然后用MCX小柱净化，Acclaim TM C18，2.2μm，3.0×100mm色谱柱分离，最后在电喷雾正离子多反应监测模式下，使用高效液相色谱-串联质谱分析方法进行分析。乌洛托品在1.00～20.00μg/kg的范围内呈现良好的线性关系良好,它的线性方程为Y=2391.11X 253.197,R²gt;0.99。该方法检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别为0.30μg/kg和1.00μg/kg。在1.00、10.00、20.00μg/kg三个添加水平下，乌洛托品的平均回收率为80.2%～107.0%，相对标准偏差为2.48%～4.18%。该方法操作简便、检出限低,可满足腐竹中乌洛托品的检测要求。

关键词：腐竹 乌洛托品 高效液相色谱-串联质谱

Abstract

Recently, with the increase of people’s living standards and the enhancement of health awareness, food quality is being put into a high level, people pay more and more attention to the safety of food. Methenamine is one of non-food substances released by the Ministry of Health 151 kinds, the decomposition of formaldehyde under weakly acidic conditions, with sterilization, antiseptic effect, there are certain carcinogenic effects. However, the corresponding test methods and testing standards are still lacking, therefore, to carry out testing yuba, rice noodles and other foods methenamine residual control is very important.

The purpose of this paper is by high performance liquid chromatography - tandem mass spectrometry method for the determination of methenamine yuba. The samples were ground and extracted by acetonitrile, further purified by MCX solid phase extraction column, and separated by Acclaim TM C18，2.2μm，3.0×100mm column. Finally in the electrospray ionization in positive ion multiple reaction monitoring mode, using high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry analysis. The method showed a good linearity at the range of 1.00~30.00 μg/kg for urotropine with R²gt;0.99. The limits of detection (LOD) was 0.30 μg/kg and the limits of quantification (LOQ) was 1.00 μg/kg for urotropine. Average recoveries of urotropine varied from 80.2% to 107.0% with relative standard deviations of 2.48%~4.18% at three fortification levels of 1.00, 10.00 μg/kg and 20.00 μg/kg. The method has the advantages of simple operation, low detection limit, can meet the detection requirements of Yuba urotropine.

Key words: Yuba urotropine high performance liquid chromatography - tandem mass spectrometry

目 录

摘要………………………………………………………………………………Ⅰ

Abstract…………………………………………………………………………Ⅱ

第一章 文献综述…………………………………………………………………1

1.1 引言…………………………………………………………………………………………1

1.2 乌洛托品的理化性质………………………………………………………………………2

1.3 乌洛托品的功能和应用……………………………………………………………………2

1.4 高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）技术……………………………………………3

1.4.1 液相色谱-串联质谱概述……………………………………………………………3

1.4.2 液相色谱-串联质谱联用仪（LC-MS/MS）的结构…………………………………4

1.4.3 液相色谱-串联质谱分析技术的应用………………………………………………5

1.5 论文意义及内容……………………………………………………………………………5

1. 实验内容…………………………………………………………………7

2.1 实验材料与方法……………………………………………………………………………7

2.1.1 实验材料 ……………………………………………………………………………7

2.1.2 实验仪器设备 ………………………………………………………………………8

2.2 实验方法……………………………………………………………………………………9

2.2.1 样品处理 ……………………………………………………………………………9

2.2.2 液质联用仪分析条件 ………………………………………………………………9

2.3 结果与讨论 ………………………………………………………………………………11

2.3.1 提取溶剂的选择……………………………………………………………………11

2.3.2 净化…………………………………………………………………………………11

2.3.3 UPLC色谱系统对乌洛托品色谱的影响……………………………………………11

2.3.4 检出限、定量限……………………………………………………………………12

2.3.5 标准曲线……………………………………………………………………………12

2.3.6 回收率及精密度……………………………………………………………………13

第三章 结论与展望 ……………………………………………………………15

3.1 结论 ………………………………………………………………………………………15

3.2 展望 ………………………………………………………………………………………15

参考文献…………………………………………………………………………17

致谢………………………………………………………………………………20

第一章 文献综述

1.1 引言

乌洛托品，即六亚甲基四胺，是一种具有吸湿性的白色结晶粉末或有光泽的无色菱形结晶体。医学研究表明：皮肤反复接触乌洛托品结晶会引发一系列疾病，主要是湿疹和皮炎，例如湿疹性皮炎、过敏性接触性皮炎等；在酸性溶液中，乌洛托品会分解为氨及甲醛，其中甲醛是具有一定致癌作用的^[1]，因此，乌洛托品一直是禁止在食品中使用的非法添加物。在国家卫生部门最新公布的可能违法添加在食品中的非食用物质名单中，明确规定了禁止在腐竹、米线等食品中加入乌洛托品。最近及年，随着国家严厉打击腐竹生产厂家添加吊白块的违禁行为，一些不法的腐竹生产厂家发挥聪明才智，改变配方，为了保持产品的色泽、延长保质期等，利用乌洛托品来代替吊白块的作用^[2,3]，消费者食用乌洛托品后严重的危害了他们的身体健康。从国内外的最新研究成果看，目前，文献所报道的检测乌洛托品的方法主要有分光光度法^[4]、高效液相色谱法^[5]、高效气相色谱法^[6,7]、激光拉曼光谱等^[8]。其中，分光光度法的特点是仪器设备简单，易于进行，但是这种检测方法的干扰比较大，灵敏度比较低；高效液相和气相色谱法的准确度较高、线性较好、回收率较高，因此与这两种方法的研究相关的报道也相对较多，然而，它们检测的灵敏度却并不高。高效液相色谱质谱联用法^[9,10]不但具备了高效液相色谱法的准确度高、线性好、回收率高的特点外，而且具有更低的检测限，检测的灵敏度也更高，为检测豆制品中的乌洛托品提供更好的分析方法，故本研究将采用这个目前更好的检测方法测定豆制品中的乌洛托品，为测定腐竹中的乌洛托品残留量提供技术上的支持，并希望能为腐竹中乌洛托品测定标准的建立进程加速。查阅过去这方面的研究可以发现，它们大多数都集中在乌洛托品片中乌洛托品纯度的检测，而与腐竹中乌洛托品的测定方法相关的报道更是屈指可数^[11,12]；在测定乌洛托品残留量的标准方面，仅有SN/T2226-2008《进出口动物源性食品中乌洛托品残留量的检测方法 液相色谱-质谱/质谱》这一标准，然而，它的适用范围是鸡肉、鸡肝脏、鸡肾脏和猪肉中乌洛托品残留量的检测和确证^[13]，目前，并没有国家或地方标准是针对于测定腐竹等豆制品中的乌洛托品残留量。所以安全监管该类食品，保护消费者的合法权益，开展测定腐竹等豆制品中乌洛托品的标准方法研究具有十分重要的意义。

1.2乌洛托品的理化性质

乌洛托品，其结构如图1-1所示，它是由6个甲醛分子与4个氨分子缩合成的化合物。

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