产谷氨酸脱羧酶重组菌株发酵条件的优化及重组酶的初步应用任务书
2022-01-11 17:41:19
全文总字数:3749字
1. 1. 毕业设计(论文)的内容、要求、设计方案、规划等
(1)前言:说明γ-氨基丁酸的结构、功能及应用情况;理清几种常见的γ-氨基丁酸制备方法,并阐明酶法(麸酸脱羧酶)制备γ-氨基丁酸的特点及优势;综述国内外在麸酸脱羧酶研究及制备中的进展;并阐述本课题研究的意义。
(2)方案拟定:在实验开展之前,请根据与指导教师讨论情况结合文献阅读,设计实验技术路线,并进一步讨论优化。本研究基本方案为:首先通过基因工程手段构建产麸酸脱羧酶基因工程菌;然后对重组菌发酵条件进行初步优化;在此基础上利用制备的重组酶转化谷氨酸制备γ-氨基丁酸,并对转化条件进行优化。
(3)实验数据采集与处理:获得的实验数据主要是:核酸电泳图、蛋白电泳图、不同发酵条件下的产酶活力,以及重组酶转化谷氨酸制备γ-氨基丁酸的浓度及转化率等。所有数据基于重复实验。
2. 参考文献(不低于12篇)
[1] dung pham v, somasundaram s, lee sh, park sj, hong sh. efficient production of gamma-aminobutyric acid using escherichia coli by co-localization of glutamate synthase, glutamate decarboxylase, and gaba transporter. j ind microbiol biotechnol, 2016, 43(1): 79-86.
[2] jun c, joo jc, lee jh, kim yh. thermostabilization of glutamate decarboxylase b from escherichia coli by structure-guided design of its ph-responsive n-terminal interdomain. j biotechnol, 2014, 174: 22-28.
[3] kang tj, ho na, pack sp. buffer-free production of gamma-aminobutyric acid using an engineered glutamate decarboxylase from escherichia coli. enzyme microb technol, 2013, 53(3): 200-205.