1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述

1、前言

蛋白酶，水解蛋白质肽键的一类酶的总称，是使蛋白质中肽键的断裂产生游离氨基酸、小肽或肽段的催化剂。它广泛存在于植物、动物和微生物中，是一种重要的工业化应用的酶制剂，与淀粉酶、脂肪酶并称三大酶类^[1]。广泛用于洗涤剂、制革、医药、食品加工、饲料、化学工业、废物处理等行业。蛋白酶的多样性以及它们特定的功能已经引起了世界范围内对开发它们的生理学和生物工程的的广泛关注。微生物具有生长速度快、生长条件较简单、代谢过程特殊和分布广等特点，以微生物为来源的蛋白酶，由于具有培养简便，产量丰富等特点，适于工业化生产而得到广泛应用^[2]。高温蛋白酶属于蛋白酶的一类，它具有高温热稳定性、耐蛋白质变性剂、耐有机溶剂、半衰期较长等特性^[1]。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

在本实验室，我们得到了得到一株突变后的产高温蛋白酶的地衣芽孢杆菌x-2，在此类蛋白酶工业的应用上有大好的应用前景。我们利用基因克隆的方法对其进行扩增，对基础的生物应用方法学习有重要的意义。

我们研究的主要内容和方法有：

根据文献设计引物→进行pcr克隆→pma和目的基因导入bl大肠杆菌→挑取转化子进行提取重组质粒→将提取的质粒导入枯草芽孢杆菌wb600→在牛奶平板上培养改造的枯草芽孢杆菌→挑选转化子（有水解圈）的进行发酵以及检测蛋白酶活。