论文总字数：26912字

摘 要

目前，生物资源的利用成为了许多国家的重点研究领域，这其中木质纤维素的利用也成为许多科学家研究的一个重点。

本文主要介绍木质纤维素降解菌系的分离与鉴定。将采集到的秸秆通过我们的实验进行初筛和复筛从而筛选出我们所需要的菌系。在通过16S rDNA和TGGE分析技术对该菌系进行鉴定。

实验结果表明，经过筛选选出来的的复合菌系在37℃中温条件下，只需要3到6天的时间就能将秸秆分解近70%，纤维素降解达40%，半纤维素降解达60%。所以该菌系对木质纤维素的降解十分的高效，达到了我们的要求。然后在通过菌群的16S rDNA的鉴定发现，复合菌系主要有芽孢杆菌属和梭状芽孢杆菌属，胞外能够分泌粘液，表面形态多样，并且能不断的分泌纤维素酶和半纤维素酶，这类关键酶对于秸秆的降解过程产生很大的促进作用。

关键词：木质纤维素 复合菌系 降解 16S rDNA TGGELignocellulose degradation compound screening and identification of bacteria

Abstract

Currently, the use of biological resources has become a key research areas in many countries, which make use of lignocellulose also become a focus of many research scientists.

This paper describes the isolation and identification of lignocellulose degradation bacteria system. The straw collected through our primary and secondary screening experiments thus screened strains we need. Identification of bacteria in the system and by 16S rDNA TGGE analysis techniques.

Experimental results show that, after screening elected composite strains at 37 ℃ temperature conditions, only need 3-6 days time will be able to straw decomposition nearly 70% up to 40% degradation of cellulose, hemicellulose degradation of up to 60 %. So bacteria Department of lignocellulose degradation is very efficient and met our requirements. Then identified by 16S rDNA flora found mainly in complex strains of Bacillus and Clostridium, can secrete extracellular mucus, surface morphology varied, and can continue to secrete cellulase and hemicellulase such a key enzyme in the degradation of straw have a great role in promoting.

Keywords: Wood cellulose; compound; degradation of bacteria; 16S rDNA; TGGE

目 录

摘 要 I

Abstract II

第一章 文献综述 1

1.1木质纤维素的概述 1

1.2 木质纤维素的预处理方法 2

1.2.1 物理方法 3

1.2.2 化学方法 4

1.2.3 生物方法 5

1.3 木质纤维素生物降解机理 5

1.3.1 纤维素的降解酶 6

1.3.2 半纤维素的降解酶 7

1.3.3 木质素的降解酶 7

1.4 微生物对木质纤维素的降解 7

1.4.1 真菌对纤维素的降解 8

1.4.2 细菌对纤维素的降解 8

1.4.3 微生物对半纤维素的降解 8

1.4.4 微生物对木质素的降解 9

1.5 复合菌系降解木质纤维素的国内外研究现状 9

1.6 分子生物学在复合菌系研究中的应用 11

第二章 实验材料 14

2.1 主要实验药品 14

2.2 主要实验仪器 14

第三章 实验方法 15

3.1 复合菌系的筛选 16

3.1.1 筛选培养基的配制 16

3.1.2 复合菌系的初筛 16

3.1.3 复合菌系的复筛 17

3.2复合菌发酵培养体系 17

3.2.1 复合菌系生长浓度OD值测定 17

3.2.2 复合菌系发酵环境PH测定 17

3.2.3 发酵液COD测定 18

3.2.4 秸秆总质量减少率及各组分质量减少率的测定 18

3.2.5 关键酶活（纤维素酶活和半纤维素酶活）测定 19

3.3 菌群的鉴定 20

3.3.1 复合菌系总DNA提取 21

3.3.2 设计选择引物进行16S rDNA的PCR扩增 21

3.3.3 TGGE体系分离DNA 22

3.3.4 TGGE指纹图谱分析 22

3.3.5 菌群分类与鉴定 23

3.3.6 基因测序及分析 23

第四章 实验结果与分析 24

4.1 复合菌系筛选结果 24

4.2 复合菌系发酵周期特征分析 24

4.2.1 复合菌系发酵生长周期中OD值、PH值分析 24

4.2.2 复合菌系关键酶活的分析 25

4.2.3 秸秆降解性能分析 26

4.3 复合菌组成的鉴定 27

第五章 实验结论与展望 30

5.1 实验结论 30

5.2 展望 30

参考文献 33

致谢 34

第一章 文献综述

1.1 木质纤维素的概述及其组成

是天然可再生木材经过化学处理､机械法加工得到的有机絮状纤维物质,无毒､无味､无污染､无放射性｡广泛用于混凝土砂浆､石膏制品､木浆海棉､沥青道路等领域,对防止涂层开裂､提高保水性､提高生产的稳定性和施工的合宜性､增加强度､增强对表面的附着力等有良好的效果｡其技术作用主要是:触变､防护､吸收､载体和填充剂^[1]｡

请支付后下载全文，论文总字数：26912字