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摘 要

半夏（Pinellia ternata (Thunb.)Breit）作为广泛分布于我国的中药材，有着悠久的药用史。在半夏药用逐渐规模化的今天，其人工栽培遇到了各种各样的问题。软腐病是一种世界范围内的土传细菌性病害，主要由果胶杆菌属细菌引起。在半夏人工栽培的过程中，软腐病的侵害较为严重，使半夏产量、品质降低，极大影响了其药用规模化进程。

本研究对半夏组织进行化学诱变，并对诱变后的半夏进行丛生苗培育，并测定其抗软腐病的性能。实验选用EMS（甲基磺酸乙酯）为化学诱变剂，以0%、0.3%、0.6%、0.9%、1.2% 6个EMS浓度作为诱变浓度处理，分别进行2、6、18 h的诱变，通过半夏丛生苗的增殖率、致死率等生长观测，以及软腐病侵染试验，结果表明在0.3% EMS诱变2h处理下，诱变株在48h内病症较轻，且有延缓软腐病菌发病的效果，可为后期筛选半夏抗软腐病植株提供实验参考。

关键词:半夏;EMS;化学诱变;软腐病

Abstract

Pinellia ternata (Thunb.) Breit., as a widely distributed Chinese herbal medicine, has a long history of medicinal use. Today, Pinellia medicinal is gradually being scaled up, and its artificial cultivation has encountered various problems. Soft rot is a worldwide soil-borne bacterial disease, mainly caused by pectin bacteria. In the process of artificial cultivation of Pinellia ternata, the soft rot disease was more severely affected, which reduced the yield and quality of Pinellia ternata, which greatly affected its medicinal scale process.

In this study, Pinellia ternata tissue seedlings were chemically mutagenized, and mutagenic seedlings were bred and the resistance to soft rot was determined. The experiment selected EMS (ethyl methane sulfonate) as a chemical mutagen, treated with EMS concentrations of 0%, 0.3%, 0.6%, 0.9%, and 1.2% as the mutagenic concentration, respectively, for 2, 6, and 18 h, through the observation of the growth of Pinellia ternate seedlings, lethality and other growth observations, as well as soft rot infection test, the results showed that under the treatment of 0.3% EMS mutagenesis for 2h, the mutagenic strains had mild disease within a certain period of time. And it has the effect of delaying the incidence of soft rot bacteria, which can provide an effective reference for the screening of disease-resistant plants in the next Pinellia mutagenesis experiment.

Keywords: Pinellia ternata; EMS; chemical mutagenesis; soft rot

目录

摘要 1

第一章 文献综述 4

1.1半夏概述 4

1.2半夏组织培养技术 4

1.3半夏的EMS诱变 5

1.4半夏软腐病防治 5

1.5研究目的和意义 5

第二章 T2半夏EMS诱变 6

2.1 材料准备 6

2.2实验方法 7

2.3 结果与讨论 7

第三章 软腐病侵染及致病性分析 15

3.1 材料准备 15

3.2实验方法 15

3.3结果与讨论 16

第四章 总结与展望 25

4.1 总结 25

4.2 展望 25

参考文献 26

致谢 28

第一章 文献综述

1.1半夏概述

半夏Pinellia ternata (Thunb.)Breit.属于天南星科(Araceae)多年生宿根草本植物,得名于《礼记•月令》“五月半夏生,盖当夏之半,故为名也” ,是我国传统中草药,在中药处方中使用频率排名第22位^[1],用药历史悠久。半夏主要分布于我国西北、华北、西南、中部地区,是治疗咳嗽,呕吐,感染和炎症的常见中药^[2],在2015年版的《中国药典》中作为收录为正品药材使用^[3]。

半夏是一种杂草性植物,喜欢生长于质地疏松肥沃的土壤中,忌旱怕涝、耐阴惧晒。当外界环境条件如气温、水分或光照等发生较大变化而不适合其生长时,往往能看到半夏的地上部分倒伏并逐渐枯黄,俗称倒苗^[4]。在倒苗之前,其叶柄基部或顶部的珠芽多数已经成熟,当生长条件适宜时,半夏块茎和珠芽又可继续长出植株,所以在半夏规模化生产中寻找到防治半夏倒苗的方法,不但能让植物光合作用时间加长,而且可以促进植株生物量增加,不失为是一种卓有成效的规模化增产途径^[5]。

1.2半夏组织培养技术

植物组织培养技术，利用植物细胞的全能性，对植物进行无性繁殖的技术，是现代社会中必不可少的植物培养方法，半夏组织培养是当下半夏规模化生产的重要途径之一^[6-7],在半夏组织培养方面，贾明良优化了一种种苗扩繁途径——“丛生块茎途径”，通过切割半夏组培苗叶柄进行愈伤组织诱导，进而进行丛生芽诱导和生根诱导以得到离体块茎，最后种离体块茎从而得到更多的材料，此方法为半夏种苗扩繁提供了一条性价比、操作性较高的技术途径^[8]。丁兰、朱宝成报道了半夏悬浮培养的研究，建立了一种半夏悬浮培养和植株再生的新体系^[9]。本课题组也从细胞层面对半夏原生质体进行分离再生培养。各种文献表明，半夏的组织培养技术已逐渐趋于成熟，组织培养技术在半夏人工规模化生产的今天是一条行之有效的途径。

1.3半夏的EMS诱变

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