1. 毕业设计（论文）的内容和要求

（1）掌握文献查阅的一般方法，学会在中国期刊网、web of science科学引文索引、springer link电子期刊、elsevier sdos电子期刊等检索资源上查阅关于s-腺苷甲硫氨酸及酿酒酵母atp合成与供给研究等的相关文献，并对酿酒酵母的基因工程操作有全面了解。

（2）文献阅读及综述：阅读与课题相关的中英文文献，了解国内外的研究动态，撰写文献综述。

（3）明确实验任务，拟定实验方案：根据所查阅文献的内容，确定研究内容及方案，拟定科学可行的研究计划。

2. 参考文献

[1] todisco s, di noia m a, castegna a, et al. the saccharomyces cerevisiae gene ypr011c encodes a mitochondrial transporter of adenosine 5′-phosphosulfate and 3′-phospho-adenosine 5′-phosphosulfate[j]. biochimica et biophysica acta (bba)-bioenergetics, 2014, 1837(2): 326-334.

[2] zhao w, shi f, hang b, et al. the improvement of sam accumulation by integrating the endogenous methionine adenosyltransferase gene sam2 in genome of the industrial saccharomyces cerevisiae strain[j]. applied biochemistry and biotechnology, 2016, 178(6): 1263-1272.

[3] hayakawa k, kajihata s, matsuda f, et al. 13 c-metabolic flux analysis in s-adenosyl-l-methionine production by saccharomyces cerevisiae[j]. journal of bioscience and bioengineering, 2015, 120(5): 532-538.

3. 毕业设计（论文）进程安排

2017.1-2017.2 熟悉实验原理和实验操作，查阅文献，对课题进行初步探索。

2017.2-2017.3 获得多个菌种来源的sam合成酶基因，并在高产sam的酿酒酵母中进行诱导表达，比较不同来源的sam合成酶的粗酶活，考察重组菌株的sam产量。进一步串联表达sam合成酶和能促进氧传递和atp合成的vhb蛋白，考察其对胞内sam生产的影响。

2017.4-2017.5 考察一些辅因子基因的过量表达及甲硫氨酸和atp等添加量对sam合成的影响，解析amp合成和分解代谢中关键酶对菌株胞内atp水平、碳流分配和sam合成等生理代谢的影响，并考察发酵后期用流加廉价的葡萄糖来代替价格昂贵的 atp的可行性，在实现sam的高产的同时，降低发酵成本。