LAMP法食源性微生物快检仪的比对文献综述
2020-05-11 23:23:56
文 献 综 述
一、食品进行快速检测的作用及意义
食品快速检测技术是指,包括样品制备在内,能够在短时间 (一般认为在2h)内出据检测结果的行为。具体体现在3个方面:(1)实验准备要简化;(2)样品经简单前处理后即可检测;(3)分析方法简单、快速、准确。在整个检测技术中,仪器是较为关键的一环[1]。传统的检测过程,检测仪器步骤复杂、价格昂;随着科技的不断进步,出现的便携性设备操作简单、价格可接受,并向着小型化、集成化、模块化、自动化、信息化的方向发展[2] 。
食品安全问题是关系国民健康的最重要的问题之一, 也是全球关注的热点问题,食品的种类繁多涉及面广,仅靠常规的化学检测仪器已不能满足现场快速检测的需要,食品安全快速检测技术,作为一种新型的检测方法已成为了一项重要的食品安全检测工具,相对于传统化学检测与仪器检测而言,其主要特点是能够便于携带、需要样品量小、操作简单快速、结果判断直观明了、节约成本、对仪器设备等条件的要求不高,该技术在食品卫生监督工作中的应用虽还不具规模,但近几年发展很快,在一些大型接待和食品安全保障活动(如2008年奥运会及残奥会、冀台心两岸情等大型经济洽谈会及重大会议)灾后防疫(如5.12 大地震抗震抢险及灾后恢复重建)食品安全专项整治活动以及日常卫生监督监测工作中发挥了重要作用,同样在食物中毒等突发性食源性疾患以及排除投毒等应急事件的现场快速检测中,也是进行筛查的首选方法[3]。本文着重介绍LAMP法微生物快检仪的设备性能,及其在今后的应用模式研究。
二、食品快速检测的方法
1.1 免疫传感器
免疫传感器(immunosensor)是将免疫测定技术与传感技术相结合的一类新型生物传感器,在结构上与传统生物传感器一样,可分为生物敏感元件、换能器和信号数据处理器3部分[4]。生物敏感元件是固定抗原或抗体的分子层;换能器是将识别分子膜上进行的生化反应转变成光、电信号;信号数据处理器则将光、电信号放大、处理、显示或记录下来,当待测物与分子识别元件特异性结合后,所产生的复合物通过信号转换器转变为可以输出的电信号、光信号,从而达到分析检测的目的。
1.2蛋白质芯片技术
蛋白质芯片技术(proteinchips)也称蛋白质微阵列(proteinmicroarrays)它是将捕获配基密集点阵于某一介质载体上,形成所谓的探针,利用配基与待检测样品中目标分子的特异性结合,再通过各种检测设备对试验结果进行定性或定量分析的一种技术。由于可在同一水平上对大量的不同靶分子进行平行分析,因而具有高通量的特点。
Bussow等[5]首次构建了高密度点阵(112点每平方厘米)的蛋白质芯片用于对cDNA文库所表达的蛋白质进行分析;Uetz等[6]首次报道了用于酵母蛋白质之间相互作用的蛋白质组水平上的微阵列;Zhu等[7]将克隆的5800个酵母细胞所表达的相应蛋白点阵,用以构建蛋白质组微阵列,从而发现了许多新的钙调蛋白和磷脂蛋白。