陈皮配方颗粒特征图谱研究毕业论文
2022-04-18 22:24:54
论文总字数：17769字
摘 要
本文运用高效液相色谱法建立陈皮配方颗粒的特征图谱，并对其特征图谱进行研究。经前期条件优化选择，最终选择以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（柱长为25 cm，内径为4.6 mm，粒径为5 µm），乙腈为流动相A，1%的醋酸为流动相B，按测得最优梯度进行梯度洗脱，柱温为30 ℃，流速为1.0 ml/min，检测波长为283 nm，进样量为5 μL。理论板数按橙皮苷峰计算应不低于2000。
实验共取了11批样品进行测定，得到由8个共有峰构成的陈皮配方颗粒特征图谱，且11批样品的特征图谱与对照图谱相似度均在0.90以上，证明实验结果可被用于陈皮配方颗粒的定性鉴别。同时，对于精密度、稳定性、重复性进行测定，结果均良好，证明实验结果可为陈皮配方颗粒的鉴别和质量评价提供参考。
关键词：陈皮 陈皮配方颗粒 高效液相色谱法 特征图谱
ABSTRACT
In this paper, characteristic chromatogram of Chenpi Peifangkeli (Citri Reticulatae Pericarpium formula granule) is studied and established by using high performance liquid chromatography (HPLC) method. By optimizing the separation conditions in preliminary experiments, finally the column filler choose octadecyl silane bonded silica (column length of 25 cm, diameter of 4.6 mm, particle sizes of 5 µm), mobile phase A is cetonitrile, mobile phase B is 1% acetic acid, gradient elution mode is applied according to the obtained optimal gradient, the column temperature is 30 ℃, the flow rate is 1.0 ml/min, detection wavelength is set at 283 nm, the sample injection volume is 5 µl. Theoretical plate number calculated on hesperidin peak should be not less than 2000.
The experiment took a total of 11 batches samples to measure, the characteristic chromatogram of Chenpi Peifangkeli is composed of eight characteristic peaks, and the similarity of the 11 batches samples and reference characteristic chromatogram were over 0.90. It is proved that the characteristic chromatogram can be used for the quality control of Chenpi Peifangkeli. At the same time, the precision, stability and repeatability were determined and the results were good. It is proved that the characteristic chromatogram can provide reference for the identification and quality evaluation of Chenpi Peifangkeli.
Key Words: Citri Reticulatae Pericarpium; Chenpi Peifangkeli; HPLC; Characteristic chromatogram.
目 录
摘 要 I
ABSTRACT II
第一章 绪论 1
1.1 历史沿革 1
1.2 化学成分 1
1.2.1 挥发油 1
1.2.2 黄酮类 2
1.2.3 其他成分 2
1.3 药理作用 2
1.3.1 抗氧化作用 2
1.3.2 抗菌抗炎作用 3
1.3.3 抗肿瘤作用 3
1.3.4 对消化系统的作用 3
1.3.5 对心血管系统的作用 4
1.3.6 平喘祛痰作用 4
1.3.7 其他作用 5
1.4 临床应用 5
第二章 实验方法的建立 7
2.1 仪器与试药 7
2.1.1 仪器 7
2.1.2 试药 7
2.2 检测波长 7
2.3 流动相的优化 7
2.4 系统适用性考察 8
2.4.1 色谱柱考察 8
2.4.2 柱温的选择 9
2.4.3 流速的考察 10
2.5 供试品溶液的制备 11
2.5.1 提取溶剂的考察 11
2.5.2 提取方式的考察 13
2.5.3 提取时间的考察 14
第三章 实验结果与讨论 16
3.1 特征图谱的建立 16
3.2 方法学考察 16
3.2.1 精密度考察 16
3.2.2 稳定性考察 18
3.2.3 重复性考察 19
3.3 样品测定 20
3.4 相似度分析 22
3.5一致性验证 23
参考文献 25
致 谢 27
第一章 绪论
陈皮，为芸香科植物橘 Citrus reticulata Blanco 及其栽培变种的干燥成熟果皮。药材分为“陈皮”和“广陈皮”。采摘成熟果实，剥取果皮，晒干或低温干燥[1]。陈皮味苦、辛，性温，归肺、脾经。陈皮的药用作用有理气健脾、燥湿化痰等[2]。
1.1 历史沿革
《神农本草经》最开始记载陈皮，将陈皮列于上品“橘柚”，书中描述到:“橘柚，味辛温而命名‘橘皮’”[3]，陈皮理气、消食、健脾等功效也在《神农本草经》初次提及。在《本草纲目》中，陈皮又被叫做黄橘皮，除此之外，《本草纲目》书中还记载有青橘皮(即青皮)[4]。李时珍说:“橘皮性温，柑、柚皮性冷，不可不知。”其说明了橘皮、柑皮以及柚皮的性味的差别，不应混合使用。在南北朝《名医别录》中，除了陈皮理气的功效外，另外加上了陈皮止泻、利尿止淋这两个功效[5]。随着历代医学家的临床实证，陈皮的化痰作用开始在著作中被详细化，随之被列为其主要功效。例如，《药性论》中写到：“清痰涎，开胃治上气咳嗽，主气痢，破癥瘕痃癖，治胸膈间气。”[6]；《本草拾遗》以及《日华子本草》中都有记录陈皮理气调中、消痰止咳的作用[7,8]；《本草备要》以及《本草从新》等中都有记录陈皮能够燥湿化痰[9,10]。
1.2 化学成分
陈皮中含有多种化学成分，挥发油、黄酮类以及微量元素等其他成分为其主要化学成分。
1.2.1 挥发油
陈皮中挥发油的含量约为2%～4%[11]，主要包括柠檬烯、γ-松油烯、β-月桂烯、α-蒎烯、β-蒎烯、芳樟醇、柠檬醛和α-萜品醇等，其成分也受多种因素的影响，如来源、采集、存放时间和炮制加工等因素，其含量差异较大。陈有根等人[12]做了相关的实验研究，实验研究结果证明，陈皮的产地来源不同，陈皮中挥发油的含量也会有所差异,而产生这种结果的原因可能是与油室对于药材厚度的占比有关。但是产地不同的陈皮，柠檬烯、7-松油烯、α-松油醇以及β-月桂烯等成分都为其主要含量成分[13,14]。
1.2.2 黄酮类
该类化学成分的基本母核均为2-苯基色原酮，此中主要成分有橙皮苷[15]、新橙皮苷、柚皮苷、柚皮芸香苷、川陈皮素和3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮为，同时还具有多甲氧基黄酮类化合物，如5,6,7,3′,4′-五甲氧基黄酮、1,5,6,7,3′,4′-六甲氧基黄酮、1,5,7,8,3′,4′-六甲氧基黄酮等 [16]。
1.2.3 其他成分
陈皮还含有多种丰富的、人体生命必需的营养元素，如维生素B、维生素C、肌醇、麝香草酚和β-谷甾醇等[16]。采用原子吸收分光光度法，林广云等人做了相关实验，实验结果分析得到，陈皮样品中还含有钠、镁、钾、钙、锌、铜、铁、锶和锰等多种微量元素[17]。
1.3 药理作用
1.3.1 抗氧化作用
主要为黄酮类化合物起此作用。体外实验研究表明，陈皮提取物能够去除次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统中生成的O2-以及Fenton反应中生成的OH-,并且能够对于经氧自由基发生系统（FRGS）诱导后的小鼠心肌匀浆组织脂质的过氧化作用产生抑制作用[18]，抑制了动物油的自动氧化以及羟自由基（•OH）的清除等，有利于体液免疫和细胞免疫，产生抗衰老、抗疲劳的作用；体内实验研究表明，陈皮水提取溶液能够抑制心、脑、肝组织的脂质过氧化，对SOD酶的相对活性具有增强作用[19]。
1.3.2 抗菌抗炎作用
陈皮提取液有良好的抗菌作用，经过实验证明，陈皮于室温下储存一年后，其提取液仍然具有一定的抗菌活性[20]。
同时，陈皮中陈皮素对人体内滑膜纤维细胞以及嗜酸性粒细胞产生拮抗作用，能够破坏细菌的结构，同时抑制琥珀酸脱氢酶（SDH）以及苹果酸脱氢酶（MDH）的活性，干扰细胞膜渗透，影响细胞成分释放，从而导致细胞代谢的障碍。同时，陈皮素对于蛋白质的合成起抑制作用，从而细菌细胞会固缩从而死亡。
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