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1. 1. 毕业设计（论文）的内容、要求、设计方案、规划等

（1）前言：陈述普鲁兰酶的催化特点，结构功能特点及在淀粉酶解过程中应用情况；阐述普鲁兰酶常见的几种来源及其克隆、表达、酶学定性及在实际应用过程中的国内外研究进展；在此基础上，阐述本课题研究的意义。

（2）方案拟定：在实验开展之前，请根据与指导教师讨论情况结合文献阅读，设计实验技术路线，并进一步讨论优化。本研究基本方案为：首先通过基因工程手段构建产普鲁兰酶基因工程菌；在此基础上，获得重组酶，对重组酶酶学性质进行考察、定性。

（3）实验数据采集与处理：获得的实验数据主要是：核酸电泳图、蛋白电泳图、不同条件下的酶学性质，以及重组酶转化转化淀粉底物所得产物的分子量及分布情况。

2. 参考文献（不低于12篇）

(1). bertoldo, c., duffner, f., jorgensen, p.l., antranikian, g. 1999. pullulanase type i from fervidobacterium pennavorans ven5: cloning, sequencing, and expression of the gene and biochemical characterization of the recombinant enzyme. appl. environ. microbiol. 65, 2084-2091.

(2). chen, w.b., nie, y., xu, y., xiao, r. 2014. enhancement of extracellular pullulanase production from recombinant escherichia coli by combined strategy involving auto-induction and temperature control. bioprocess biosyst. eng. 37, 601-608.

(3). choi, j., lee, s. 2004. secretory and extracellular production of recombinant proteins using escherichia coli. appl. microbiol. biotechnol. 64, 625-635.