论文总字数：21473字

摘 要

二十二碳六烯酸，简称DHA，是一种属于ω-3系列的多不饱和脂肪酸。由于含有6个不饱和双键，因此比较容易发生氧化反应，使得DHA产品发生变质，同时也对发酵过程中的预期产量，产品收率以及产品质量造成不良影响。针对这些问题，本论文通过选择添加抗氧化剂中的抗坏血酸钠来避免细胞抗氧化能力低以及不饱和脂肪酸易受氧化等问题。本论文考察了添加3g/L、6g/L、9g/L、12g/L四种浓度的抗坏血酸钠对裂殖壶菌发酵过程的影响。经实验研究表明，添加抗坏血酸钠明显增强细胞抗氧化能力（T-AOC）并降低了胞内氧自由基（ROS）水平。当抗坏血酸钠添加浓度为9g/L时，油脂含量达到最大，为65.50g/L，比对照组高出16.9%，DHA产量为34.59g/L，比对照组高出30.18%。另外，实验结果显示添加抗坏血酸钠能够有效提高多不饱和脂肪酸含量，降低饱和脂肪酸含量，为DHA的工业化生产提供了较好的理论指导。

关键词：裂殖壶菌 DHA 抗氧化能力 氧自由基 抗坏血酸钠

Effects of Sodium ascorbate on DHA Production of Schizochytrium

Abstract

Docosahexaenoic acid （DHA）is an important kind of omega-3 polyunsaturated fatty acids.Because of containing six unsaturated double bonds,it is more prone to occuring oxidation, making DHA product deterioration,and also has adverse impact on expected production, the product yield and the quality of the product of the fermentation process.This paper solve these problems that cell antioxidant capacity is low and unsaturated fatty acids are susceptible to oxidation and so on, with adding antioxidant ascorbic acid sodium.This paper examines the influence on Schizochytrium fermentation process by adding 3 g/L, 6 g/L, 9 g/L, 12 g/L four concentrations of sodium ascorbate.The experimental study shows that adding sodium ascorbate significantly enhance cellular antioxidant capacity (T - AOC) and reduce the level of intracellular oxygen free radicals (ROS).When the concentration of sodium ascorbate is 9 g/L, the oil content is maximum, 65.50 g/L, 16.9% higher than the control group,and DHA production is 34.59 g/L, 30.18% higher than the control group.In addition, the experimental results show that adding ascorbic acid sodium can effectively increase the polyunsaturated fatty acid content, reduce saturated fatty acid content, provides a better theoretical guidance for the industrialization of the DHA production.

Keywords: Schizochytrium; DHA; antioxidant; Oxygen free radicals; Sodium ascorbate

目录

摘 要 I

Abstract II

目录 III

第一章 文献综述 1

1.1 DHA概述 1

1.1.1 DHA简介 1

1.1.2 DHA生理功能 1

1.1.3 DHA的来源 3

1.1.4 DHA生物合成途径 4

1.2 发酵影响因素 5

1.2.1 营养物质 5

1.2.2 溶氧 6

1.2.3 抗氧化剂 6

1.3 课题研究意义及内容 7

1.3.1 研究意义 7

1.3.2 研究内容 7

第二章 实验材料与方法 8

2.1 实验材料 8

2.1.1 菌种 8

2.1.2 实验试剂 8

2.1.3 实验仪器 9

2.1.4 培养基 10

2.2 试验方法 10

2.2.1 培养方法 10

2.2.2 葡萄糖测定 10

2.2.3 生物量测定 11

2.2.4 总抗氧化能力(T-AOC)测定 11

2.2.5 氧自由基（ROS）测定 11

2.2.6 油脂提取与含量测定 12

第三章 实验结果与讨论 13

3.1 添加抗坏血酸钠对裂殖壶菌细胞总抗氧化能力（T-AOC）和胞内氧自由基水平（ROS）的影响 13

3.2 添加抗坏血酸钠对裂殖壶菌生长的影响 14

3.3 添加抗坏血酸钠对油脂含量、油脂组成及DHA产量的影响 15

3.4 添加抗坏血酸钠对角鲨烯含量的影响 18

第四章 结论与展望 19

4.1 结论 19

4.2 展望 19

参考文献 21

致 谢 25

第一章 文献综述

1.1 DHA概述

1.1.1 DHA简介

DHA，中文名为二十二碳六烯酸（Docosahexaenoic acid），属于ω-3型多不饱和脂肪酸，分子式为C₂₂H₃₂O₂，相对分子量为328.49，其结构简式如图1所示。

DHA分子结构的碳氢链中有六个不饱和双键，并且有多个双键都处于非共轭体系，具有顺式构型，化学结构中具有高度不饱和性，因此物理性质表现为熔点低、流动性较高。DHA含有五个活泼的亚甲基，使其易受光、氧、热、金属元素（Fe² , Cu² 有催化作用）及自由基的影响，比较容易发生氧化、酸败、聚合、双键共轭化等化学反应，产生一些挥发与非挥发性的物质，如：醛、酮醇、酸以及羰基化合物^[1]。

图1 DHA分子结构式

1.1.2 DHA生理功能

作为长链多不饱和脂肪酸，DHA对人体机能来说是一种很重要的营养物质，但是人类机体自身很难合成，所以必须要从外界食物中摄入。其主要的生理功能具体包括以下几点：

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