1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

课题：姬松茸凝集素的的分离纯化

文献综述

凝集素是指具有凝集作用的非免疫来源的糖结合蛋白或糖蛋白。它具有凝集细胞、抑制肿瘤细胞增殖、促有丝分裂和激活淋巴细胞、抗菌、促进藻细胞原生质体再生及局部麻醉等多种功能的生物活性。凝集素从发现至今已有 100多年的历史,然而对凝集素研究比较广泛的则是植物凝集素进入20世纪70年代 ,尤其是近30年,凝集素的研究方兴未艾,成为当今生物及医学中研究极为活跃的领域之一. 随着对凝集素各种生物学作用研究的展开, 必然需要不同来源、性质的凝集素, 因而促使人们去发现和研究一些新的凝集素。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

姬松茸凝集素的提取纯化：

称取姬松茸实体干品100g,剪碎,按1:5(W/V, g/mL)加入0.05mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,含0.14mol/LNaCl,pH7.2)500mL,4#176;C浸泡过夜,次日匀浆。于4#176;C、5000r/min离心30min,上清液分别加入固体(NH4)2SO4进行20%#8212;70%分级沉淀,4#176;C静置过夜,收集沉淀物溶于PBS,透析除盐,浓缩后置于4#176;C冰箱保存。
将上述上清液加到活性炭柱(1.6cm#215;18.7cm),以2倍于柱体积的PBS洗脱,流速为3mL/min,收集洗脱液,浓缩,并对PBS充分透析后上DEAE-SepharoseFF柱(1.3cm#215;7.5cm),以PBS洗脱,分部收集,流速为40mL/h,每管4mL。从第30管开始,改用内含0.5mol/LNaCl的PBS进行线性离子梯度洗脱,分部收集同前。经280nm紫外和血凝活性检测,收集具有血凝活性的洗脱峰,经浓缩、PBS透析后上SephadexG-100柱(1.6cm#215;50cm),以PBS洗脱,分部收集,流速为24mL/h,每管4mL,检测方法同前。活性组份透析除盐,冷冻干燥,得到纯化的姬松茸凝集素样品。