酸性磷酸酯酶的聚乙烯醇固定化及相应酶活影响的研究文献综述
2020-04-16 16:44:18
文 献 综 述 酸性磷酸酯酶(Acid Phosphatase,AP,EC3.1.3.2)是一类在酸性条件下水解磷酸单酯键的水解酶。
AP家族的一些成员是金属水解酶,在催化中心存在两个异价金属离子,电子从酪氨酸残基向三价铁离子转移使多数的AP同工酶呈现独特的紫色,因此这类酶又被称为紫色酸性磷酸酯酶(PAP)。
还有一些成员是抗酒石酸盐酸性磷酸酯酶(TRAP),主要是因为这类酶不同与其他一些同工酶对酒石酸盐的抑制异常敏感,这类酶并不受L型酒石酸盐的抑制[1,2]。
1.酶的理化性质: 1.1理化性质 相对分子质量55000#177;5000,最适pH值5.0~5.5,在pH值5.0~6.0之间最稳定,不能被Mg2 所活化,氟化物对它们有明显抑制作用,对水解磷酸甘油(为该类酶的标准底物)中的α-异构体比β-异构体快。
1.2底物颜色反应 酸性磷酸酶也可以分解一些特殊的有机磷底物,产物可以显现特异的颜色,如 5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐(5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate,BCIP,蓝色)、萘酯磷酸盐(β-NaphthylAcid Phosphate,β-NAP/Fast black K,紫红色)、对硝基酚磷酸二钠(p-NitrophenolPhosphate,pNPP,黄色)。
通过反应产物颜色的深浅,可以判断酸性磷酸酶的活性高低。
本实验将用到磷酸苯二钠特异性底物反应进行酶活的测试。
2.酶的来源: 2.1动物及人体来源 酸性磷酸酶广泛存在于体内各组织、细胞和体液中。
血液中的酸性磷酸酶的组织来源是前列腺、肝、脾、肾、红细胞、白细胞、血小板,以前列腺含量最为丰富。
正常男性血清中酸性磷酸酶1/3~1/2来自于前列腺,女性血清中的酸性磷酸酶主要来自肝脏、红细胞和血小板。
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