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酶解玉米蛋白界面特性的研究毕业论文

 2022-01-27 15:01:08  

论文总字数:11711字

摘 要

玉米蛋白主要来源于玉米淀粉提取过程中的副产物,因其疏水性氨基酸含量高,水溶性差,在食品加工中难以直接利用。本文采用碱性蛋白酶作用于玉米蛋白,分析了酶解程度对玉米蛋白的乳化活性和乳化稳定性的影响,并以酶解玉米蛋白为载体,研究了水解玉米蛋白纳米微粒与槲皮素的相互作用及载荷槲皮素的蛋白纳米微粒包埋及释放效果。实验结果:与对照样相比,不同水解度的玉米蛋白乳化性与乳化稳定性均有明显提高,水解度15%的玉米蛋白(多肽),乳化性为44.95,乳化稳定性为144.92;槲皮素可以猝灭玉米蛋白的内源荧光,载荷槲皮素的水解度20%玉米蛋白微粒有良好的包埋和缓释效果。

关键词:玉米蛋白,缓释,纳米颗粒,包埋

Abstract

Controlled delivery of a bioactive to specific organ, cellular and sub-cellular level is a desired feature of a drug carrier system. In order to achieve this goal, formulation scientists search for better alternatives of biomaterials to deliver the therapeutics in more precise and controlled manner in vivo. Zein, a plant protein obtained from corn, is a useful biomaterial for several industrial applications including agriculture, cosmetics, packaging and pHarmaceuticals. Being a hydropHobic protein, which is biodegradable, biocompatible, economic to use and with generally regarded safe “GRAS” status, it is an attractive biomaterial for human use. Novel biomedical applications of zein such as controlled and targeted delivery of bioactives and tissue engineering are the Querent research interests of the scientific fraternity. Here we attempt to review the literature on zein as a biopolymer for drug/vaccine/gene delivery and its applicability in tissue engineering.

Keywords:zein, Sustained release, Nanoparticles, Embedding

目录

摘要 2

Abstract 3

第一章 绪论 5

1.1玉米蛋白 5

1.1.1 玉米蛋白的基本性质 5

1.2槲皮素 7

1.2.1 槲皮素的基本性质 7

1.3.研究的目的与内容 8

1.3.1研究目的 8

1.3.2 研究内容 8

第二章 实验材料及方法 9

2.1实验材料与设备 9

2.1.1实验材料 9

2.1.2实验主要的仪器与设备 10

2.2实验方法 10

2.2.1碱性蛋白酶酶解玉米蛋白的方法 10

2.2.2蛋白水解度( DH)的计算 10

2.2.3水解玉米蛋白乳化性(EAI)和乳化稳定性(ESI)的检测 11

2.2.4槲皮素标准曲线的建立 11

2.2.5酶解程度对玉米蛋白的粒径和电位的影响 12

2.2.6 槲皮素(Que)复合蛋白纳米颗粒的制备 12

2.2.7槲皮素的包埋与缓释 13

2.2.8槲皮素对玉米蛋白的荧光猝灭 13

第三章 实验结果与讨论 14

3.1酶解时间对玉米蛋白水解程度的影响 14

3.2不同水解度玉米蛋白对乳化性和乳化稳定性的影响 15

3.3槲皮素吸光度的的标准曲线 16

3.4不同水解度的zein对粒径和电位的影响 16

3.5槲皮素包埋率的检测 17

3.6槲皮素对玉米蛋白的荧光猝灭 17

第四章 结论 18

4.1 结论 18

参考文献 19

致谢 20

绪论

1.1玉米蛋白

1.1.1 玉米蛋白的基本性质

玉米蛋白主要是由玉米醇溶蛋白组成,其约占玉米蛋白含量的三分之二。玉米蛋白来源广阔、提取要求低、成本便宜,可以被生物所降解,具有可再生性及良好的生物相容性。

玉米醇溶蛋白中,谷氨酸、亮氨酸、脯氨酸、丙氨酸占据了大部分氨基酸的比例,玉米蛋白有着大量的非极性氨基酸。正是由于这些特殊的氨基酸,玉米蛋白体现出较强的疏水性及一定的抗胃酸分解特性,而这些特性作为载体材料有利于延缓药物在体内的释放[1]

1.1.2玉米蛋白研究现状

1.1.2.1 玉米蛋白的酶法改性

酶法改性和美拉德反应可以有效的增加玉米醇溶蛋白在水中的溶解度。酶法改性中最重要的一种方法是利用蛋白酶在温和条件下催化蛋白水解。酶解改性的优点是专一性高、条件温和和高效,此外,可以预期有毒副产物产生的可能性是很小的,因此酶解蛋白已成为提高蛋白质各种功能特性和增加其应用范围的一种有效方法,目前是食品蛋白改性的研究重点。酶法改性中比较常用的一种方法是使用蛋白酶对蛋白质进行控制水解改性,其本质是利用了蛋白酶的切割作用将蛋白切割,使其变成更小的蛋白或者多肽甚至氨基酸。蛋白酶解产物的功能特性很大程度上被底物蛋白特性、酶的特异性和(degree of dygrolysis,DH)决定。DH是指与蛋白中肽键总量相比,断裂肽键所占的百分比。控制酶水解通常是通过控制DH来实现。而DH的控制可以通过控制E/S比例、酶解时间、反应温度等酶解反应条件来实现。控制酶水解对蛋白质通常有一下三种效果:分子量降低、带点基团增多、疏水性基团暴露。蛋白功能特性的改变就是这些效果的作用结果。

1.1.2.2 玉米蛋白的美拉德反应

美拉德反应(Maillard Reaction)又称非酶褐变(Non-enzymatic Browning)[2]。当食物被加工时,美拉德反应在改善食物的外观和味道中发挥了重要作用。美拉德反应一直以来是食品工业中的一个重要反应,在传统的加工过程中面临的主要问题与香气,味道和颜色有关。比如烘焙咖啡和可可豆,烘焙面包和蛋糕,谷物烘烤和肉类烹饪。在广泛发生的美拉德反应过程中,反应产物的形成对食物的营养价值有重要意义——可以减少有毒的形成和致病的突变化合物,也可以形成抗氧化产物而改善食品性质。美拉德反应的化学反应非常复杂。它不包含一个反应路径但整个网络的各种反应。原本的综合反应机理由Hodge提出,后经食品技术专家研究和阐述,对反应的理解正在稳步推进。尽管如此,美拉德反应还只是一类反应的统称,其反应过程和程度很难控制。可以影响和控制美拉德反应的因素很多,有反应的糖和蛋白质的种类,反应的温度、pH值、水分活度、压强等,还有一系列氧化剂、酶制剂等等。

1.1.3 玉米蛋白为载体的研究

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