一种新型褐藻胶裂解酶AlyPL6的克隆表达及其固定化开题报告
2020-04-17 19:46:48
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
文 献 综 述 1 褐藻胶及褐藻胶寡糖概况 褐藻胶(alginate)是一种由巨藻、海带和马尾藻等褐藻中提取而得的高聚合度的酸性多糖,是细胞壁的主要组成物质[1]。
褐藻胶是由β-d-聚甘露糖醛酸(m)和α-l-聚古罗糖醛酸(g)通过1→4糖苷键连接而成的直链多糖[2]。
目前,褐藻胶被广泛应用在食品、医药、日用化工和农业等领域[3],然而仍存在一些不足:分子量较大,分子质量范围一般在104~106 u,凝胶性强,黏度大,不易被机体吸收等,使其进一步的应用受到限制[4]。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
研究问题: (1)将alypl6的基因克隆转化到大肠杆菌表达载体上,获得可异源表达的大肠杆菌重组菌株,用该菌株异源表达相应的褐藻胶裂解酶。
(2)利用吸附法固定了褐藻胶裂解酶alypl6,试验了并确定了酶固定化的最佳条件,并考察了固定化酶的重复使用次数。
研究手段: (1)对褐藻胶裂解酶alypl6重组表达载体构建以及相应表达纯化 (2)对褐藻胶裂解酶alypl6进行固定化后,进行酶固定化的最佳条件(ph,温度),并构建固定化酶活随使用次数变化曲线
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