固定化载体介孔二氧化钛表征及应用文献综述
2020-04-13 17:07:28
文 献 综 述
1.1 γ-谷氨酰转肽酶概述
1.1.1 γ-谷氨酰转肽酶的分布
γ-谷氨酰转肽酶[1](γ-glutamyltranspeptidase,GGT,E.C.2.3.2.2)在不同生物体内的分布不同。在真核生物中,主要是以结合酶的形态存在。昆虫中的GGT与哺乳动物中的一致,亦是膜结合酶,存在于微粒体中。真核生物的GGT在水中是不溶的,但经过有机溶剂或酶处理后可变成水溶性的。原核生物中,酶能溶解于水,且主要存在于细胞浆液中或分泌到细胞外。GGT在不同菌属的细胞中分布的位置也不尽相同。例如在大肠杆菌中,酶主要存在于细胞周质空间,而对于枯草芽孢杆菌,则可以分泌到细胞外。
1.1.2 γ-谷氨酰转肽酶的结构特点及催化机制
GGT是一个异源二聚体糖蛋白,由一个大亚基(约40KD)和一个小亚基(约20KD)组成[2-3]。不同来源的GGT分子量可能会有较大差异,且活性也会有较大差异。酶学研究表明,GGT只对含γ-谷氨酰基的化合物有光学和立体专一性催化作用,且催化过程不需要ATP。研究表明,GGT的催化机制遵循乒乓机制。GGT的催化残基上的-OH首先亲核攻击谷氨酰供体上γ-位上的羰基碳原子,形成谷氨酰基化的酶分子(与谷氨酰基以酯键连接);然后在受体亲核基团(如-NH2)攻击下形成新的谷氨酰基化合物,并释放出酶分子。该反应称为”γ-谷氨酰基化反应(γ-glutamylation)”。
根据受体底物的不同,γ-谷氨酰基化反应可分为三类:
(1)转肽反应(Transpeptidation):受体为L-氨基酸或二肽及带α-氨基的小分子化合物等;
(2)自转肽反应(Autotranspeptidation):当供体分子同时作为受体分子时。例如谷氨酰胺,可同时作为供体与受体;
(3)水解反应(Hydrolysis):受体分子为水分子时,其产物为谷氨酸。