HRV14-CA054的基因合成及其连接、转化和筛选文献综述
2020-05-23 15:59:34
文 献 综 述
1.1相关概念
1.1.1基因合成
基因合成是指在体外人工合成双链DNA分子的技术,目前常用的方法有聚合酶链式反应.聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点,是能将微量的DNA大幅增加。
1.1.2聚合酶链式反应
主要有三个重要的步骤:变性,退火,延伸。所需要的材料及仪器有:灭菌管,dNTP,酶,PBO buffer,灭菌水,移液器,灭菌枪头,DMSO,回收胶,检测胶,回收胶染料,检测胶染料,拍胶仪,切胶仪,PCR仪等等。
1.2HRV14-CA054
1.2.1定义
HRV14-CA054即丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。蛋白激酶(protein kinases,PK)又称蛋白质磷酸化酶(protein phosphakinase),是一类催化蛋白质磷酸化反应的酶。它能把腺苷三磷酸(通常是ATP)上的γ-磷酸转移到蛋白质分子的氨基酸残基上。在大多数情况下,这一磷酸化反应是发生在蛋白质的丝氨酸残基(ser)和苏氨酸残基(thr)上,也会发生在酪氨酸(tyr)残基上。 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine-threonine protein kinase, STPK) 是一类能使特定底物蛋白中丝氨酸或苏氨酸羟基磷酸化的酶,是一类在三维结构上相似,活性中心含有丝氨酸/苏氨酸残基,并且可以依靠其醇式羟基催化肽键水解的蛋白水解酶,特异地催化蛋白质底物上的丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化。
1.2.2蛋白激酶的种类