1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

1.1研究背景、目的和意义

碱性蛋白酶是指在碱性条件下具有活性，能够水解蛋白质肽键的酶类, 是商品蛋白酶中应用最广、产量最大的一类蛋白酶，是商业上非常重要的酶类。现已广泛应用于洗涤剂、制革及丝绸工业。它在医药、食品、饲料、环保、银回收、化学工业、基础研究中显示了广泛的应用前景， 已成为国内外研究热点。然而， 许多碱性蛋白酶在工业化应用中存在局限性， 比如在含阴离子表面活性剂和氧化剂的环境中活力和稳定性均较低以及培养基的成本约占工业化碱性蛋白酶成本的30%～40%[1,2]。

碱性蛋白酶广泛存在于微生物中，而地衣芽抱杆菌是盛产碱性蛋白酶的传统菌株，具有产蛋白酶量大，耐高温、高碱等特点， 因此对地衣芽抱杆菌碱性蛋白酶的研究成为蛋白酶研究的热点。碱性蛋白酶作为工业上主要酶添加剂之一,在饲料工业、动物食品加工、丝绸和制革工业中具有广泛用途，尤其在饲料工业方面，添加碱性蛋白酶到动物饲料中可以提高饲料利用率， 利用碱性蛋白酶水解大豆蛋白生产大豆多肤等。目前， 我国研究和生产的碱性蛋白酶的活力水平虽然不断提高，但大多数采用进口的碱性蛋白酶制剂，并且大规模工业生产中用的碱性蛋白酶还是主要依赖进口[3]。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1.本课题研究的问题以及意义

碱性蛋白酶作为在工业、农业、食品、环保等方面重要的酶类，目前的研究重点在于寻找具有高产、高效、耐高温、耐高碱的四高型蛋白酶。浩瀚的海洋以其独特和多样的生态环境，形成了有别于其它环境的独特而丰富的海洋微生物资源，并产生种类繁多的具有独特结构和功能的生物活性物质，因此，从海洋微生物中寻找特异活性的碱性蛋白酶是一个值得研究的课题。

本实验从采集的海水中提取碱性蛋白酶菌株，首先把菌株分离纯化，通过观察菌株生长后，测定水解圈直径（ d ）和菌落直径（ d ）的比值来进行产碱性蛋白酶细菌的初筛，然后利用酶活力的测定来进行产碱性蛋白酶细菌的复筛。筛选后的菌株进行发酵，选出生长良好的菌株后，进行单因素实验，利用folin酚测定酶活力。通过优化发酵条件，提高碱性细菌的产酶能力，以期寻找具有潜在工业开发价值的工业酶。