1文献综述 1.1研究背景及意义 生物膜是微生物为了适应不利生存环境，被自身产生的胞外聚合物所包裹的高度密集微生物群体[1]。

目前普遍认为生物膜是微生物被自身分泌的水合多聚物包裹，覆盖于固体表面含有微生物集落的黏性膜层，可由单一菌种形成，也可由多菌种形成，是微生物抵抗不利环境的一种不可逆的生存方式。

其与悬浮状态下的微生物有着显著的区别，如基因转录、表型变异及代谢机制的改变等方面［2-4］。

生物膜形成的基本要素有固体物表、高度密集的微生物(近似每毫升含 水生物膜中1010个细胞)、胞外聚合物(extracellular polymer，EPS)与胞外黏性基质、各种复杂的理化过程以及微生物群落之间的相互作用，但是并非所有的生物膜都具有这些特点。

其中，EPS由微生物自身产生，是生物膜的主要成分，由胞外多糖、聚糖醛酸、蛋白质、核酸以及脂质等成分构成。

研究表明，丙酮丁醇梭菌细胞能够吸附在特定载体上，大量聚集后分泌胞外多聚物EPS，进而促发菌体细胞以生物膜的形式生存，可明显增加高活性菌体密度，提高细胞耐受性和反应活性，对提高生物丁醇生产过程的时空效率具有重要意义，同时将促进有关固定化细胞技术和生物膜反应器的发展。

PrkC是一种保守的Ser / Thr蛋白激酶。

研究表明，炭疽芽孢杆菌PrkC的缺失消除了其形成生物膜的能力，PrkC通过以磷酸化依赖性方式调节GroEL活性来调节生物膜形成[5]。

1.2研究的基本内容 采用II型内含子插入失活技术（ClosTron）对野生型丙酮丁醇梭菌（Clostridium acetobutylicum B3）的PrkC基因（CA_C0404）进行定点敲除构建PrkC突变菌株，并把构建好的PrkC表达质粒转化到突变菌中构建回补菌，通过分子生物学实验进行验证。

然后通过发酵产生物膜实验考察三种菌在菌落表型、细胞形态、生物膜形貌等方面的变化，以验证该基因在EPS形成中的生物学功能。