1.凝血因子Ⅺ的性质、作用及应用。

1.1凝血因子Ⅺ的性质

凝血因子Ⅺ（FⅪ），又称为ROSENTHAL因子，即抗血友病球蛋白C，是一种丝氨酸蛋白酶原，由肝细胞和巨核细胞合成。在已知的至少15种凝血因子中, FⅪ在内源性凝血途径中起重要作用，在血浆中其与高分子量激肽原以非共价结合形成复合物。FⅪ分子量为１６０ｋD，由２条相同分子量（８０ｋD）的多肽链通过二硫键连接形成二聚体, 等电点( PI) 约8.19#8212;9.11,储存稳定,具有肝素结合位点。ＦⅪ在血循环中以酶原形式存在，凝血过程中在磷脂表面被活化的凝血因子Ⅻ（ＦⅫａ）、凝血酶或自身裂解所激活，生成活化的凝血因子Ⅺ（FⅪa）。FⅪa由含4个AP结构域(apple domain)的重链(45～50 kD)和含丝氨酸蛋白酶活性的轻链(35 kD)通过二硫键连接。

1.2 凝血因子Ⅺ的作用

FⅪ是血浆中的一种微量蛋白组分[ ( 2#8212;7) mg/L ] ,血液循环中的FⅪ活性( FⅪ∶C)正常值范围为( 17#8212;115) U /ml,低于此范围可能为FⅪ缺乏症,其主要的临床表现为外伤或者手术后出血时间延长。虽然FⅪ缺乏症不像血友病A、B那样严重,但是在一定程度上也影响了患者的生活质量。

1.3 凝血因子Ⅺ的应用

凝血因子Ⅺ(factor Ⅺ．FⅪ)缺陷症在1953年由Rosenthal等首次报道，是一种常染色体隐性遗传性出血病，曾被称为血友病C。其出血常与创伤及手术相关，特别是凝血因子Ⅺ促凝活性(factor Ⅺ clotting activity．FⅪ：C)的血浆水平与出血发生率及出血程度间无明显相关性，使该疾病的诊断和治疗存在多变性。FⅪ缺陷症患者出血时最早是应用新鲜冷冻血浆(FFP) 进行治疗，20世纪80年代FⅪ浓缩剂出现并应用于临床。于FFP相比，FⅪ浓缩剂能缩短输注的时间，并能避免引起其他凝血因子水平增高。

2．CHO细胞

2.1 CHO细胞简介

CHO细胞即中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary)，该细胞具有永生性，可以传代百代以上，是目前生物工程上广泛使用的细胞。全世界批准正式应用于人类疾病治疗或疾病预防的基因工程产品约有三十多种，其中只有一种(乙肝疫苗)是由酵母菌生产的，其余所有产品都是由CHO细胞和大肠杆菌生产的。大肠杆菌不能形成有活性的二聚体(如白介素2)，也不具有糖基化的功能(如EPO)，而CHO却具有如上的功能，因此CHO成为表达复杂生物大分子的理想宿主。另外CH0细胞在基因工程使用中还有一个优点，该细胞属于成纤维细胞(fibroblast)，是一种非分泌型细胞，它本身很少分泌CHO内源蛋白，因此对目标蛋白分离纯化工作十分有利。CH0细胞可形成有活性的二聚体(如白介素2)，具有糖基化的功能(如EPO)，成为表达复杂生物大分子的理想宿主。