论文总字数：23799字

摘 要

本文首先对DHA的结构性质及生理功能进行了介绍，然后介绍了DHA的来源和当前进展，同时以裂殖壶菌发酵产DHA发酵过程为研究对象，研究不同酵母膏对细胞增长，油脂积累，DHA含量的影响，获得最优的酵母膏，紧接着介绍了DHA的发酵方法，以及进一步的研究意义和内容——通过裂殖弧菌 HX-308为菌种来发酵制备DHA，并对氮源进行优化。再通过研究不同时间(24h、48h、72h)补加不同浓度谷氨酸钠（0.4g/L和0.8g/L）对细胞增长，油脂积累，DHA含量的影响，获得最优的补加时间和补加浓度。以裂殖弧菌HX-308为菌种，第一步采用单因素实验在50L发酵罐中对发酵过程中酵母膏进行选择（提高油脂产量和DHA含量），第二步对最优氮源和补氮时间进行对比选择，最后一步进行放大实验（验证试验结果）。最后通过放大实验验证以上实验结果，为工业化生产提供理论指导。

关键词：裂殖弧菌 DHA 氮源

Optimization of nitrogen source strategy during DHA fermentation process

Abstract

Firstly for DHA structure properties and physiological functions were introduced, and then introduced the source of DHA and the current status, also to fission chytrid fungus fermentation to produce DHA fermentation process as the research object, research different yeast extract on cell growth, lipid accumulation, effects of DHA, the optimal yeast extract, followed by the introduction of DHA fermentation method, and further the research significance and content -- the crack colonization Vibrio HX-308 as strain to ferment to produce DHA, and on the nitrogen optimization. Through study of different time (24h, 48h, 72h) added different concentrations of sodium glutamate (0.4 g / L and 0.8 g / L) on cell growth, lipid accumulation, the effect of DHA content and obtain the optimal fill time and adding concentration. Schizochytrium sp. HX-308 strain, the first step by single factor experiment in 50L fermenter fermentation yeast extract for selection (increase oil production and DHA content). In the second step, the optimal nitrogen source and nitrogen feeding time were compared and selected. The final step of amplification experiment (verification test results). Finally, the results of experiments are verified to provide the theoretical guidance for industrial production..

Keywords: Schizochytrium sp. HX-308 DHA nitrogen source

目 录

第一章 引言 6

1.1 DHA的结构、性质及生理功能 6

1.1.1 DHA的结构、性质 6

1.1.2 DHA的生理功能 7

1.2 DHA的来源及市场应用 9

1.2.1 DHA的来源 9

1.2.2 DHA的市场应用 9

1.3 我国DHA的生产现状及研究进展 9

1.4酵母膏的功能及应用 10

1.5本课题的研究内容和意义 11

第二章 裂殖壶菌 HX-308菌种培养及不同供氧条件对发酵产DHA影响的研究 12

2.1引言 12

2.2 实验材料与方法 13

2.2.1 菌种 13

2.2.2 实验试剂 13

2.2.3 实验仪器 14

2.2.4 培养基 15

2.2.5 培养方法 15

2.2.6 分析方法 16

2.3 实验结果与讨论 17

2.3.1实验方法 17

2.3.2 裂殖壶菌生长曲线 18

2.3.3 GC脂肪酸分布 19

2.3.4单因素实验 20

2.4本章小结 31

第三章 结论与展望 32

3.1 结论 32

3.2 展望 32

参考文献 34

致谢 38

第一章 引言

1.1 DHA的结构、性质及生理功能

1.1.1 DHA的结构、性质

DHA是二十二碳六烯酸（Docosahexaenoic acid）的英文缩写，是有六个双键的多元不饱和脂肪酸（C22H32O2），是一种ω-3必需脂肪酸 ^[1]，它的摩尔质量为328.488g·mol^-1,其结构简式如图1-1所示：

图1-1 DHA分子结构式

Fig. 1-1 Molecular structure of DHA

如图1-1，DHA通常是顺式，但在某些异构酶作用下可变成反式,在这其中DHA含有多个“戌碳双烯”结构及5个活泼的亚甲基。DHA在这些活泼的亚甲基的作用下极易受光、氧、过热、金属元素（如Fe、Cu）及自由基的影响^[2]，产生聚合、氧化、酸败、双键共轭等化学反应，产生以羰基化合物为主的鱼臭物质。

纯DHA为无色、无味，常温下呈液态，且具有脂溶性，易溶于有机溶剂，不溶于水，熔点为－45.5~－44.1，所以在低温下仍然能保持较高的流动性。人和其它哺乳动物只有△4、△5 、△6及△9去饱和酶，缺乏△9 以上的去饱和酶,因此无法自身合成DHA，必须由食物来提供。

1.1.2 DHA的生理功能

1. 抗凝血、抑制血栓形成

DHA能抑制血小板凝集，减少血栓素形成，从而预防心肌梗塞、脑梗塞的发生。血小板合成的血栓素（TXA2）具有促进血小板凝集和收缩血管的作用，血管内皮产生的前列腺素（PGI2）具有抑制血小板凝集和舒张血管的作用^[3]，TXA2 和PGI2 之间的平衡是调节血小板和血管功能，它们是促进血栓形成的关键。TXA2 和PGI2 是以花生四烯酸（AA）为前体，通过磷酸化酶的作用从细胞膜磷酸甘油酯中释放出来。对血栓病患者,可使患者的血小板存活时间延长,血小板计数减少, 血小板因子的血浆水平下降， 血浆中血栓球蛋白降低，可阻止血小板与动脉壁相互作用，延缓血栓形成。

请支付后下载全文，论文总字数：23799字