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毕业论文网 > 文献综述 > 化学化工与生命科学类 > 生物工程 > 正文

来自赤红球菌的P450单加氧酶的克隆及表达研究文献综述

 2020-06-23 20:58:41  

1.1课题研究背景 1.1.1细胞色素P450的简介 细胞色素P450(cytochromeP450或CYP450,简称CYP450)代表着一个很大的可自身氧化的亚铁血红素蛋白家族[1],属于单氧酶的一类,因其在450纳米有特异吸收峰而得名。

它参与内源性物质和包括药物、环境化合物在内的外源性物质的代谢[2]。

近年来,对细胞色素P450的结构、功能特别是对其在药物代谢中的作用的研究有了较大的进展。

研究表明细胞色素P450是药物代谢过程中的关键酶,而且对细胞因子和体温调节都有重要影响[3]。

P450酶兼具底物结构多样性和催化反应类型多样性,且其催化反应具有高度的区位和立体选择性[4]。

另外,因其广泛参与哺乳动物尤其是人体内的异源物质降解、解毒作用、药物代谢以及甾体类激素和维生素的合成,因此P450在药物毒性监测、药物筛选等领域有着极高的应用价值[5]。

1.1.2细胞色素P450的催化特性 在赤红球菌的基因组还没有被测序时,一个类似P450基因的片段就已经用简并引物扩增出来,类似P450的DNA片段的侧翼区域,则使用聚合酶链式反应,以基因组步移的方式识别出来[6]。

初级蛋白结构表明,它是一个天然的自给自足型聚合蛋白,由铁氧还蛋白、含黄素的还原酶和P450单加氧酶构成。

在酶中唯一找到的黄素是5'单磷酸核黄素。

该酶成功地由大肠埃希氏杆菌(Escherichia coli)表达,纯化和表征[7]。

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