解磷菌PD1601鉴定及关键性酶的初步研究任务书
2020-05-20 20:09:20
1. 毕业设计(论文)的内容和要求
研究解磷菌与解磷相关的酶的特性,水解有机磷,转化无机磷。通过平板法,液体培养法等生物学方法、生理生化试验对解磷菌进行生物学系统鉴定,通过PCR测序分析对解磷菌关键性酶(植酸酶、核酸酶和磷酸酶等)进行氨基酸识别、DNA测序、基因组研究。通过本研究,可以通过DNA组建解磷相关的酶来提高解磷菌解磷效率;利用分子标记的方法,可以了解解磷菌在不同土壤、不同作物、不同环境下的生长繁殖特点;现代农业生产长期依赖化学药剂防治各种土传病害,化学药剂在杀死病原菌的同时,也可能对解磷菌的解磷酶具有抑制作用,故向解磷菌株导入抗药性基因,可以很好地解决化学防治与解磷菌解磷酶产生的矛盾。
PCR扩增引物设计:通过Biolog与16SrDNA鉴定与解磷菌PD1601同源性最高的细菌,通过福林酚反应得知可能存在酸性磷酸化酶。
重点从特定植物的根面、根际土壤中筛选,以获得与相应植物亲和性好、易于在根系定植的菌株,从而更有利于其解磷能力的发挥。同时注重解磷微生物与植物根系生长发育和吸收功能之间的关系以及根际微生物区系构筑过程中的作用和特点。鉴定上利用常规分子生物学16S DrNA鉴定与微生物系统鉴定Biolog仪相结合的手段对筛选出的有效解磷菌进行微生物学系统分类鉴定以期发现高效降解菌株。2. 参考文献
[1] 王光华; 赵英; 周德瑞; 杨谦等,解磷菌的研究现状与展望, 生态环境,2003-03-30, 01
[2] 黄敏,吴金水,黄巧云等,土壤磷素微生物作用的研究进展,生态环境, 2003, 12(3): 366~370
[3] browne p, rice o, miller s h et al., superior inorganic phosphate solubilization is linked to phylogeny within the pseudomonas fluorescens complex, applied soil ecology, 2009, 43:131~138
3. 毕业设计(论文)进程安排
起讫日期 |
设计(论文)各阶段工作内容 |
第1周 |
课题简介 |
第2周 |
开题报告、外文翻译 |
第3周 |
实验方法的讨论及实验方案的确定、实验试剂的配制及仪器的准备。 |
第4周 |
微生物实地取样,富集,初筛,复筛。 |
第5-10周 |
利用分子生物学16S rDNA鉴定与微生物系统鉴定Biolog仪相结合的手段对酶进行生理生化鉴定。 |
第11周 |
设计引物 |
第12周 |
针对胞内胞外酶进行酶的提取 |
第13周 |
鉴定酶的活性 |
第14-15周 |
数据的整理、结果分析 |
第16-17周 |
撰写论文 |