1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

1文献综述 1.1研究背景及意义 生物膜是微生物为了适应不利生存环境，被自身产生的胞外聚合物所包裹的高度密集微生物群体[1]。

目前普遍认为生物膜是微生物被自身分泌的水合多聚物包裹，覆盖于固体表面含有微生物集落的黏性膜层，可由单一菌种形成，也可由多菌种形成，是微生物抵抗不利环境的一种不可逆的生存方式。

其与悬浮状态下的微生物有着显著的区别，如基因转录、表型变异及代谢机制的改变等方面［2-4］。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

2设计方案 2.1菌株的构建 2.1.1突变菌的构建 通过ii型内含子插入失活技术在prkc基因目标位点插入一段约2000bp的片段，导致该基因失活构建突变菌，采用分子生物学技术对其进行验证。

采用菌落pcr或者液体培养后提取基因组pcr，分别以野生菌和敲除菌的基因组为模板，根据凝胶电泳pcr扩增产物验证片段大小（插入后，pcr扩增出条带电泳图上比野生型大大约2000bp）。

将正确插入的突变株传代三次，同时涂布在含有红霉素抗性（插入基因含有红霉素抗性）的平板上进行筛选。