易错PCR对糖基转移酶UGT76G1的定向进化研究开题报告
2020-04-14 19:46:46
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
文献综述
摘要:
易错pcr属于蛋白质的非合理设计范畴,它不需事先了解蛋白质的三维结构信息和作用机制,而是在体外模拟自然进化的过程(随机突变、重组和选择),使基因发生大量变异,并定向选择出所需性质或功能的目的分子。udp-糖基转移酶是催化st甙合成ra甙的关键酶,在一定浓度mn2 存在下,经易错pcr法重复扩增,产物构建成pet28a-ugt重组子,并建立突变体文库.经筛选获得了内源dna序列变异的变异株.比较进化酶催化底物st甙的活性与亲本重组酶的活性。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
2.1研究的问题
现阶段糖基转移酶催化甜菊醇生成rebaudioside a甙等到的产率不高,所以生产过程中等到的甜菊糖中含有甜菊糖的比例太低,口感较差。而提纯成本过高,不适应用于工厂的大规模生产。但rebaudioside a甙的优良的的特性又有着巨大的市场空间。所以希望通过基因工程改造的方法来改造糖基转移酶编码基因ugt76g1,以提高糖基转移酶的活性,使其能产生大量的rebaudioside a甙,提高rebaudioside a甙在甜菊中
的比例,改良甜菊糖的口感。降低生产的成本,适用于大规模的工业生产,投放市场,满足市场对甜菊糖的需求。
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