小麦酯酶的制备开题报告
2020-04-14 16:11:00
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
文 献 综 述
伴随着食品工业的快速发展,食品检测仪器和方法逐渐成为食品科学研究的主要内容之一。我国是一个农业大国,有机磷类农药的应用范围广,使用量大。因食用农药超标食品而导致的中毒事件时有发生[1]。快速、准确、可现场检测有机磷类农药残留的方法成为研究的热点。目前常用的检测方法主要有色谱法,但其处理过程复杂,检测周期较长,无法满足快速检测的需要。用于快速检测的酶反应法[2-5],因其使用的酶类价格昂贵,限制了推广应用。而植物酯酶恰恰能够满足价廉、敏感的要求。植物酯酶广泛存在于小麦、玉米等谷物中,尤其以小麦酯酶活性最高[6]。小麦酯酶分解乙酸-α-萘酯产生α-萘酚,α-萘酚与固蓝b 盐结合形成紫红色的偶氮类化合物,发生显色反应。在有机磷类农药环境下小麦酯酶活性受到抑制。例如当小麦酯酶、乙酸-α-萘酯和固蓝b 盐混合体系中存在有机磷农药时,小麦酯酶活性受抑制,显色浅或不显色[1]。利用小麦酯酶的这一特性,可以幅度降低传统检测方法的成本。
植物酯酶提取工艺流程:小麦→粉碎→过筛→盐溶液提取→离心分离→上清液→过滤→测定酶活。
2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
1、研究问题
(1) 利用小麦酯酶价格低廉,获取容易的特点,通过测定小麦酯酶粗酶液酶活,确定小麦酯酶的适宜的提取液。
(2)通过提取液浓度、提取时间、提取温度和料液比等条件确定小麦酯酶适宜的提取工艺,并采用硫酸铵分级盐析分离对小麦酯酶粗酶液进行初步分离纯化,在纯化后的小麦酯酶酶液加入保护剂并将其冻干制成酶粉,通过冻干小麦酯酶酶粉酶活保存率来选择适宜冻干保护剂。