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毕业论文网 > 文献综述 > 化学化工与生命科学类 > 药物制剂 > 正文

液态芯片技术在淋巴癌患者血清β2M检测中的应用文献综述

 2020-04-04 12:45:48  

随着环境污染加重和生活节奏的加快,淋巴癌的发病率逐年递增。发病人群开始呈现年轻化,以20-26岁这一年龄段居多[1],且男性患者占总比例近60%。淋巴细胞发生了恶变即称为淋巴瘤,其临床表现是复杂多样的,这给诊断带来了较大的困难。如果能寻找到适合恶性淋巴癌的肿瘤标志物,就可以通过检测病人血清中相关蛋白的含量,间接反应病人的病理情况,对其治疗方案及用药情况及时做出调整[2]。经研究发现,许多疾病时β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)的含量会有所上升,可以作为观察药物疗效的指标[3,4]。其中,血清β2-MG的升高则可反映肾小球滤过功能受损或滤过负荷是否增加的情况[5,6]

β2-MG是体内细胞合成的一种由100个氨基酸残基组成低分子量蛋白质[7]。是细胞表面人类淋巴细胞抗原(Human Leukocyte Antigen, HLA)的B链(轻链)部分,为一条单链多肽。其主要存在于血清、脑脊液、尿液等体液中[8]。研究证明机体所有的有核细胞都能不同程度产生β2-MG,尤以代谢活跃的恶性肿瘤细胞为著[9]。恶性肿瘤中β2-MG浓度升高的可能机制为:(1)肿瘤细胞本身合成和分泌β2-MG加速,其产量超过正常细胞;(2)恶性肿瘤异常增生,大量的细胞破坏,使β2-MG释放量增加;(3)肿瘤细胞直接浸润肾组织,可产生免疫原性物质损伤肾脏,产生的异常蛋白质及引起的代谢紊乱致肾脏损害[10]

目前,检测肿瘤标志物的常用方法有放射免疫分析(Radio-Immunoassay,RIA)[11]、蛋白印迹法(Western Blotting,WB)、流式细胞术(Flow Cytometry,FC)、免疫组化法(Immunohistochemistry,IHC)、酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,Elisa)[12]等。这些传统的检测方法虽已成为生化指标检测的”金标准”,但仍然存在诸多不足,例如:耗时长、灵敏度低、特异性差等[6,13]

本课题采用Luminex液相芯片法(又称为微球体悬浮芯片法),它是基于xMAp技术的新型生物芯片技术平台[14]。不同荧光编码的微球上进行抗原一抗体、酶一底物、配体-受体的结合反应及核酸杂交反应,通过红、绿两束激光分别检测微球编码和报告荧光来达到定性和定量的目的,红色激光可将微球分类,从而鉴定各个不同的反应类型(即定性);绿色激光可确定微球上结合的报告荧光分子的数量,从而确定微球上结合的目的分子的数量(即定量)。因此,通过红绿双色激光的同时检测,完成对反应的实时、定性和定量分析。一个反应孔内可以完成多达500种不同的生物学反应,大大提高了检测速度。是继基因芯片、蛋白芯片之后的新一代高通量分子检测技术平台[15]。迄今为止十年时间,全球已有数百套基于xMAP技术的检测平台用于免疫学、蛋白质、核酸检测、基因研究等领域,该技术已成为一种新的蛋白质组学和基因组学研究工具,也是最早通过美国食品与药物管理局(FDA)认证的可用于临床诊断的生物芯片技术。该技术具有高通量、操作简单、灵敏度高、重复性好、精确度高、特异性强、样本用量少、检测范围广、准确性高、费用低、灵活等优点,有望取代传统的检测技术,更好的应用于科学研究及临床诊断[16]

本实验采用Luminex液相芯片技术,检测恶性淋巴瘤患者和健康人血清β2-MG浓度,探讨Luminex技术用于恶性淋巴瘤血清β2-MG检测的可行性。

参考文献:

[1] 叶君. 血清β2-微球蛋白与恶性肿瘤[J]. 中国卫生检验志,2010,20(2):332-333.

[2] 谢学礼,程时珏,杨永德,等. 血和尿β2微球蛋白、免疫球蛋白G、白蛋白测定对小儿肾脏疾病的临床意义[J]. 云南医药,1992,(3):166-167.

[3] 郝吉庆. 恶性淋巴瘤患者血清乳酸脱氢酶、β2-微球蛋白测定的临床意义[J].中国肿瘤临床与康复,2001,8(2):49-50.

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