文 献 综 述

伴随着食品工业的快速发展，食品检测仪器和方法逐渐成为食品科学研究的主要内容之一。我国是一个农业大国，有机磷类农药的应用范围广，使用量大。因食用农药超标食品而导致的中毒事件时有发生[1]。快速、准确、可现场检测有机磷类农药残留的方法成为研究的热点。目前常用的检测方法主要有色谱法，但其处理过程复杂，检测周期较长，无法满足快速检测的需要。用于快速检测的酶反应法[2-5]，因其使用的酶类价格昂贵，限制了推广应用。而植物酯酶恰恰能够满足价廉、敏感的要求。植物酯酶广泛存在于小麦、玉米等谷物中，尤其以小麦酯酶活性最高[6]。小麦酯酶分解乙酸-α-萘酯产生α-萘酚，α-萘酚与固蓝B 盐结合形成紫红色的偶氮类化合物，发生显色反应。在有机磷类农药环境下小麦酯酶活性受到抑制。例如当小麦酯酶、乙酸-α-萘酯和固蓝B 盐混合体系中存在有机磷农药时，小麦酯酶活性受抑制，显色浅或不显色[1]。利用小麦酯酶的这一特性，可以幅度降低传统检测方法的成本。

植物酯酶提取工艺流程:小麦→粉碎→过筛→盐溶液提取→离心分离→上清液→过滤→测定酶活。

小麦酯酶的制备方法：

方法一--水提取法[8-11]：

1.1 小麦酯酶的粗提取

取50g新鲜食用面粉置500mL三角瓶中，加250mL纯化水振荡30min，静置30min以上，用移液管取上清液放入50mL离心管中，5000r/min离心20min。收集上清液用冷冻干燥机浓缩至20mL左右，得小麦酯酶粗提液，保存于冰箱中待纯化。

1.2 小麦酯酶的纯化

将处理好的羧甲基纤维素悬浮液加入层析柱中，加入20mL小麦酯酶粗提液，层析柱上层液快流完时加0.005mol/L pH值为6.0的磷酸缓冲液150mL进行洗脱；再加0.1mol/L pH值为6.0的磷酸缓冲液150mL洗脱，以2 mL /min 流速做梯度洗脱，收集后1/2流出液。流出液用冷冻干燥机干燥成干粉，以0.2g/瓶封装于瓶中备用。50 g 新鲜小麦粉经粗提取、羧甲基纤维素层析、真空冷冻干燥后得到1． 217 g 小麦酯酶干粉。

方法二#8212;盐提取法[12-14]：