论文总字数：16882字

摘 要

漆酶是一类具有催化底物广泛性的含多酚的氧化还原类酶，它的运用体现在生活的方方面面。但因为游离的漆酶稳定性不佳，在实际各类领域中应用较为困难，不容易实现重复使用。为解决这一问题，本实验采用以新型的Fe₃O₄磁性纳米粒子作为其的载体，戊二醛为其交联剂，实现漆酶的固定化。而且将其与游离的漆酶在温度，pH，动力学参数,热稳定性，存储稳定性和操作稳定性等方面做对比实验，用来研究固定化后漆酶酶的酶学性质。测得固定后的漆酶反应的最为适宜的温度为60 °C，最为适宜的宜的pH为4.5，固定化后的漆酶尽管在底物亲和力方面有所下降，但在对外界环境的耐受性的方面得到了很大的提升，并且实现了漆酶的方便回收和重复利用，极大的改变了漆酶在各领域中的地位。

关键词：漆酶 磁性纳米粒子 固定化 酶学性质

Study on Characterization of the immobilized laccase

Abstract

Laccase is a catalytic substrate which have a universal polypHenol oxidase.Its use is reflected in all aspects of life.Due to free laccsae is Poor stability, in reality, all kinds of applications in the field is difficult and can not be reused.Therefore, this experiment with a new type of Fe₃O₄ magnetic nanoparticles for the immobilization carrier, glutaraldehyde, paint to achieve immobilization.And paint it with the free enzyme to do comparative experiments in temperature, pH, kinetic parameters, thermal stability, storage stability and operational stability.Used to study the enzymatic properties of the immobilized enzyme.Immobilization come after, Laccase measured after a fixed optimum temperature is 60 °C, the optimum pH is 4.5,although in terms of affinity substrate has decreased, but the tolerance of the external environment has been greatly improved,And the realization of laccase to facilitate the recovery and reuse,Greatly changed the status of laccase in various fields.

Key words: Laccsae;Nanoparticle;Immobilization;Enzymatic Properties

目 录

摘要 I

ABSTRACT II

第一章 文献综述......................................................................................................1

1.1漆酶的概述........................................................................................................1

1.1.1漆酶的简介..............................................................................................1

1.1.2 漆酶的催化特征.....................................................................................1

1.1.3漆酶的应用..............................................................................................2

1.1.4 漆酶的固定化.........................................................................................4

1.2 磁性纳米材料的概述.......................................................................................5

1.2.1 磁性纳米粒子的特点及修饰 5

1.2.2 磁性纳米粒子固定化 5

1.3 本实验的研究思路 6

第二章 实验材料与方法 7

2.1 实验材料 7

2.2 实验仪器 7

2.3 实验方法 7

2.3.1实验原理 8

2.3.2.Fe₃O₄磁性纳米粒子的制备 9

2.3.3.Fe₃O₄纳米颗粒表面修饰 9

2.3.4.漆酶的固定化 9

2.3.5固定化漆酶酶学性质的研究. 9

2.4 漆酶酶活的测定 10

2.5 载体蛋白负载率的测定 10

2.6 固定化酶酶活回收率的测定..........................................................................11

第三章 结果与讨论 12

3.1温度对固定化漆酶的影响 12

3.2 pH固定化漆酶的影响 12

3.3 固定化漆酶的动力学参数 13

3.4 固定化漆酶的热稳定性 13

3.5 固定化漆酶的储存稳定性.............................................................................14

3.6 固定化漆酶的操作稳定性 15

第四章 结论与展望 17

4.1结论 17

4.2展望 17

参考文献 19

致谢 22

第一章 文献综述

1.1漆酶的概述

1.1.1漆酶的简介

请支付后下载全文，论文总字数：16882字