重组大肠杆菌高密度发酵产海藻糖合成酶开题报告
2020-05-26 20:24:47
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
1.海藻糖概述 1.1 海藻糖简介 海藻糖(trehalose)分子10是由两个吡喃型葡萄糖分子通过α,α-1,1糖苷键连接形成的二糖,海藻糖是无半缩醛羟基的非还原性糖,化学性质极其稳定,其学名为d-吡喃葡萄糖-(1-1)-d-吡喃葡萄糖(α-d-glucopyranosyl-α-d- glucopyranoside),分子式为c12h22o11#8226;2h2o。
在1832年,由wiggers首先从黑麦的麦角菌中提取出来。
海藻糖有α,α-海藻糖、α,β-海藻糖和β,β-海藻糖三种光学异构体构型,其中α,α-海藻糖是自然界中最广泛存在的一种构型(fig1-1),在真菌、细菌、动物和植物中都可以发现[1.2]。
2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
1 本课题要研究或解决的问题 确定发酵罐菌株培养基的最佳诱导时间、最佳IPTG诱导量、最佳发酵PH、温度等培养的最佳条件,对重组大肠杆菌在发酵罐中进行高密度发酵,提取并检测酶活,由提高产海藻糖合成酶的角度优化发酵过程。
2.拟采用的研究手段 1对大肠杆菌株进行优化和培养 2接种至摇瓶发酵培养 3放大至5ml发酵罐发酵,进行菌株培养基最佳诱导时间、最佳IPTG诱导量、最佳发酵PH、温度等优化,确定培养最佳条件并培养 4使用HPLC检测酶活,优化培养细节和一些后续的分析比较