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毕业论文网 > 开题报告 > 化学化工与生命科学类 > 制药工程 > 正文

代谢工程改造解脂耶氏酵母异源合成(-)-α-红没药醇的研究开题报告

 2020-05-02 18:28:47  

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

(-)-α-红没药醇(bisabolol)是一种不饱和倍半萜醇,(-)-α-红没药醇具有良好的抗炎、抗菌、防腐和皮肤舒缓保湿等特性,在医药和化妆品行业具有很高的应用价值[1-3]。(-)-α-红没药醇主要存在于巴西桉树和药用植物德国洋甘菊中[4,5],受环境影响较大,不利于大规模提取生产。解脂耶氏酵母作为一种含油酵母,具有生产(-)-α-红没药醇的潜力。

萜类化合物,又称类异戊二烯,是最大且最多样化的天然产物之一[6]。由异戊二烯单元组成的化合物及其衍生物构成,萜类化合物就对动物膜成分(如胆固醇)和呼吸电子传递链(如泛醌)的组成至关重要[7],而对微生物和植物来说,则被发现作为药物(如紫杉醇和青蒿素),香料以及植物的次级代谢产物[8]。根据所含异戊二烯数目的不同可以分为单萜(c10)、倍半萜(c15)、二萜(c20)、三萜(c30)、四萜(c40)和多萜等[9]。萜类化合物由萜烯合成酶(tps)与通用的五碳构建单元,异戊烯二磷酸(ipp)及其异构体二甲基烯丙基二磷酸酯(dmapp)合成。ipp和dmapp合成有两种不同的途径:甲羟戊酸(mva)途径[10]和2-c-甲基-d-赤藓糖醇4-磷酸(mep)途径[11]。一般而言,革兰氏阴性菌,包括大肠杆菌,使用mep途径,而真核生物,古细菌,人类和革兰氏阳性球菌使用mva途径[12]。异戊烯转移酶组装ipp和dmapp单元以产生异戊二烯前体,其为萜类前体,包括香叶基二磷酸(gpp,c10),法呢基二磷酸(fpp,c15)和香叶基香叶基二磷酸(ggpp,c20)。这些异戊二烯二磷酸分子被tps转化为多种萜类化合物[13,14]。

天然(-)-α-红没药醇主要通过蒸汽蒸馏从巴西仙人掌树中提取的精油制造,近年来已引起环境和生物保护问题[4]。(-)-α-红没药醇也可以化学合成;然而,化学合成需要额外的经济上不可行的纯化步骤,因为形成了其他非对映异构体(( )-α-红没药醇和(#177;)-epi-α-红没药醇)和不需要的副产物[15].因此,可持续供应自然相同的(-)-α-红没药醇对特种化学工业至关重要。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

方法:

(1)先准备细菌菌株,配置培养基,在合适的培养条件下培养。正十二烷用作覆盖层以防止损失挥发物。此外,正十二烷用于在培养期间从培养基中溶解和提取(-)-α-红没药醇

(2)构建质粒

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