一．逆流色谱法

1.1逆流色谱概述　

逆流色谱(Countercurrent Chromatography , CCC)是由美籍日本学者伊东洋一郎( Y. Ito)于20世纪60年代末发明和倡导的[1]。经过30多年的演进, 已经成为了一项先进的工程分离技术。逆流色谱是一种基于多级逆流液液萃取的分析及制备色谱。溶质依靠在离心力场下旋转的空心螺旋管中逆向流动的两个不相混溶液体间, 溶质分配系数的不同而实现分离。这种色谱不需要通常填充色谱中的固体固定相。用保留于空心管内的一相液体作固定相, 另一相液体作流动相。得到的谱图通常是一些各溶质相互分离的谱峰。

逆流色谱的适用范围日益扩大。中草药和植物有效成分, 合成药成品和中间体, 生物工程产品, 锕系元素、镧系元素、贵金属及过渡金属, 但凡可以形成萃取分离体系的对象原则上都可以用逆流色谱进行分离。由于逆流色谱的分离级数非常多(色谱的共同特点) , 有些不能用普通萃取法进行分离的体系(比如分离对象的分离系数不够大) ,也可在逆流色谱上取得满意的结果[4]。而且, 逆流色谱的发展对于目前尚无满意简便方法的生物物质的分离也是一个福音。已经发展的双水相逆流色谱体系, 具有对蛋白质等生物物质的保护作用, 操作又相对简便, 特别受到生化研究者的青睐。环境工作者也发现了它的方便用途. 其他过程中有特色的萃取方法也可移植到逆流色谱中去[2]。鉴于各界, 尤其是生物医药界对分离技术的迫切需要,也由于这项技术本身已经发展到接近成熟的程度, 各国从事逆流色谱研究和应用的同行发起了国际逆流色谱专业会议( International Conference on CCC)。规定会议每2年举行1次,迄今已经举行了3次。第1次2000年在伦敦, 第2次2002年在北京, 第3次2004年在东京。已确定将于2006年在华盛顿召开第四次会议[3]。

1.2 逆流色谱的优势[5-7]

1.2.1没有固相载体

由于逆流色谱是一种基于连续逆流液液萃取的色谱型分离装置, 因而它与常见的气相色谱、液相色谱或自行填装的吸附色谱不同, 不需要固相载体, 它所需要的是一个适宜的液液体系, 即一个适宜的萃取分离体系。

1.2.2收率高

由于分离过程是在空心塑料管(通常是聚四氟乙烯管,也可选用其他适宜材料的空心管)内进行,所以一般不会发生不可逆吸附之类的样品损失,理论上的收率为100 %。相对于通常的多步化学处理来说,是一个很大的优点。

1.2.3效率高