摘 要

5’一核苷酸在农业，化工产业和医学产业普遍的被使用，有助于婴幼儿免疫、肠道成熟、蛋白质、脂肪酸合成、幼儿死亡率下降。专家们预测核苷酸是极具影响性以及功能性的生物原料，也是医学产业中的一种新的原材料。目前，我国对核苷酸的生产分离工作还比较落后，核苷酸制品主要用酶解法生产。这种核苷酸分离方法生产的产品是混合型核苷酸，使用不同原料和酶生产所得的产物不同，分离难度大，产品收率低，纯度较低。核苷酸的分离方法较为落后，很大程度限制了RNA类生物药物开发。为了应用于医药品产业，核酸也在精细化工业和食品行业发挥着重要的作用。作为添加物的核酸，在动物育种中使用的核酸，可以增加动物体重和饲料利用率。在医学产业领域，新型寡聚核苷酸的发觉，可能用于细胞探针来探究基因用途。本实验分析了上样量、洗脱剂对核苷酸分离时间、纯度、收率等影响，研究结果发现先使用蒸馏水为洗脱剂，GMP与CMP上样量为1BV，待前三种核苷酸分离出来；等到最后AMP的分离，将洗脱剂换0.2moL/L的NaOH。这种方法分离的核苷酸效果较好。

关键词：核苷酸 离子交换树脂 分离

Abstract

5'mononucleotide is widely used in agriculture, chemical industry and medical industry, which contributes to infant immunity, intestinal maturation, protein, fatty acid synthesis and infant mortality. Experts predict that nucleotides are a very influential and functional biological raw material, and also a new raw material in the medical industry. At present, the production and separation of nucleotides in China is still relatively backward, and the nucleotide products are mainly produced by enzymatic hydrolysis. The products produced by this method are mixed nucleotides. The products produced by different raw materials and enzymes are different. The separation is difficult, the yield is low and the purity is low. The isolation methods of nucleotides are relatively backward, which greatly limits the development of RNA biopharmaceuticals. nucleic acids play an important role in the fine chemical industry and in the food industry and can be used in the pharmaceutical industry. the nucleic acids are used as additives for animal husbandry in order to increase the body weight and feed efficiency.In the medical industry, the discovery of novel oligonucleotides may be used as cell probes to explore gene uses. The effects of sample size and eluent on the separation time, purity and yield of nucleotides were analyzed. The results showed that distilled water was used as eluent, GMP and CMP were 1 BV, and the first three nucleotides were separated. At the end of AMP separation, the eluent was replaced by 0.2 moL/L NaOH. The nucleotide separation effect of this method is good.

Key words: separation ； nucleotide； ion exchange resin

目录

第一章 文献综述 5

1.1核苷酸概述 5

1.2核苷酸的理化性质 5

1.2.1核苷酸的物化性质与结构 5

1.2.2核苷酸的紫外吸收与解离特征 6

1.2.3核苷酸的构象 7

1.3核苷酸的应用及价值 7

1.3.1核苷酸在医药方面价值 7

1.3.2核苷酸在生物学方面价值 7

1.3.3核苷酸对人体的影响 8

1.4离子交换树脂 9

1.4.1离子交换树脂概述 9

1.4.2离子交换树脂分类 9

1.4.3离子交换树脂的品种 9

1.5实验目的 9

第二章实验原理与材料 11

2.1实验原理 11

2.1.1离子交换原理 11

2.1.2离子交换树脂的原理 11

2.1.3离子交换工艺的操作 11

2.2实验材料 11

2.1.1实验仪器 11

2.1.2实验试剂 12

第三章内容与讨论 13

3.1实验内容与方法 13

3.1.1实验内容 13

3.1.2实验方法 13

3.2结果与讨论 15

3.2.1核苷酸浓度标准曲线 15

3.2.2AMP单组分的洗脱实验 17

3.2.3 GMP与CMP两组分实验 18

3.2.4四组分的分离实验 22

第四章 结论与展望 24

4.1结论 24

4.2展望 24

参考文献 25

致谢 28

第一章 文献综述

1.1核苷酸概述

核苷酸是一种极为关键的生物小分子，在细胞内参与多项重要的生物功能^[1]，其中最重要的作用无疑是作为核酸的基本组成单位，是生物编码遗传信息^[2]。核苷酸由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成。细胞和生物体的生物学特性决定蛋白质的结构和功能，为重要的生物材料。目前，核苷酸的主要来源有两种：①存在于人体内的内源性核苷酸；②通过酶解法等技术合成的外源性核苷酸。近年的研究发现，长期缺乏核苷酸摄人会导致免疫系统的功能减退，骨髓造血功能的降低，消化吸收功能的降低，性功能衰退，头发、指甲、身体老化，神经系统功能衰退，基因自助修复功能衰退，以及发育不良等等。现在国内厂家对核苷酸的制备、分离等流程相对来说比较落后，核苷酸的分离纯度低，速率慢，研究新的分离纯化方法任重道远。

1.2核苷酸的理化性质

1.2.1核苷酸的物化性质与结构

核苷酸的某些特性由碱基确定，例如紫外吸收、互变异构^[3];某些性质由核糖或脱氧核糖决定,例如易溶于水和具有旋光性;某些性质由磷酸基团和碱基共同决定的，某些性质与N糖苷键有关，如核苷酸特别是嘌呤核苷酸在酸性溶液中不稳定，易发生脱碱基反应。

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