1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述

1. 琥珀酸的生产研究概况

1.1.1琥珀酸的理化性质

琥珀酸，学名丁二酸，英文名称：succinic acid ，是三羧酸循环中重要的四碳二羧酸中间产物，也是某些氨基酸的降解物。分子量是118.09,无色结晶体，味酸，可燃。有两种晶型，相对密度是1.572(25/4℃).1g溶于13ml冷水，1ml沸水，18.5ml乙醇，6.3ml甲醇，36ml甘油和11ml乙醚^[1,2]，不溶于苯，二硫化碳，四氯化碳和石油醚。琥珀酸是二元羧酸，具有二元酸大多数的典型反应，由于其分子内含有活泼的亚甲基官能团，因而具有许多其它重要的反应特性，如氧化、还原、脱水、酯化、磺化、卤化、醚化等反应^[3,4]。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

2.1课题任务：构建pk18mobsacb-pyk质粒，通过酶切缺失pyk基因中的一部分片段，将质粒pk18mobsacb-Δpky电转化进入谷氨酸棒杆菌，进行培养筛选，挑取转化子进行pcr验证和酶切验证后。最后将筛选后的菌株进行好氧和厌氧发酵，通过定性分析和定量测定从而来证实经过基因工程构建好的菌株是否能很显著地提高产琥珀酸的产量和能力，是否能有效地增加葡萄糖的消耗。

2.1解决的问题是：

（1）能否将重组质粒pk18mobsacb-Δpky成功电转化进入谷氨酸棒杆菌？以及转化之后如何对转化子进行pcr验证和酶切验证？