摘 要

皮肤作为人体面积最大的器官，具有阻挡病原体和异物入侵、防止体液流失等重要的屏障保护作用以及感觉、维持机体内稳态、调节体温等一系列重要的生理功能，因此，皮肤无论因何受到损伤都必须及时修复，否则会造成创面的急慢性感染甚至是机体的功能紊乱。创伤修复是一个动态的涉及到多种细胞和细胞因子的复杂过程。大鼠骨髓间充质干细胞容易获取，细胞易于贴壁培养并且对骨髓中的造血干细胞不仅有机械支持作用，还能分泌多种生长因子来支持造血等优点。聚乙二醇（PEG）作为生物支架可促进再上皮化、创面收缩及血管重建，它具备多孔隙连通结构，拥有良好的组织相容性和注射性，可为干细胞提供三维支持，因此，是一种理想的可注射生物支架材料。但是PEG水凝胶联合骨髓间充质干细胞在皮肤损伤修复中的作用还没有人研究。本研究通过建立大鼠背部部分皮肤缺损模型，并设立实验组(peg BMSCs)，对照组1（BMSCs）对照组2 (peg)做对照，分别观察其对创面修复的影响，发现用大鼠间质干细胞和聚乙二醇水凝胶构建的组织工程皮肤移植后能使创面迅速愈合。

关键词：聚乙二醇 皮肤修复 组织工程

Abstract

Human skin is the largest organ and has numerous important physiological functions to stop pathogen and foreign matter from entering the body, to prevent fluid from losing as barriers, to maintain homeostasis, and to regulate body temperature. As a result of it, it is necessarily accurate to repair damage of skin whenever it gets hurts. Otherwise it will result in acute or chronic infections on wound even dysfunction of body. Repairing skin wounds is a dynamic and complicated procession concerned with different types of cells and cell factors. BMSCs are available and they are easy to adherent culture. They can not only support hematopoietic stem cells but secrete massive kind growth factors to guarantee hemopoiesis. Previous studies have showed that polyethylene glycol (PEG) as a biological scaffold can promote re-epithelialization, wound contraction and vascular reconstruction. With a porous structure, it has a good biocompatibility and three-dimensional microenvironment for stem cells growth and differentiation. However, the effects of PEG hydrogel with or without stem cells in skin tissue engineering remains largely unknown. At the present study, we investigated the role of PEGDA combined with rat bone-marrow derived stem cells in rat skin wound healing process. Results showed that PEGDA with stem cells could enhanced skin repair.

Keywords：PEG;skin repair;tissue engineering

目 录

第1章 绪论 1

1.1组织工程皮肤支架材料 1

1.2骨髓间充质干细胞 3

1.3聚乙二醇水凝胶 3

1.4制备水凝胶 4

第2章PEGDA的合成制备 6

2.1试剂及用量 6

2.2仪器 6

2.3操作步骤： 7

2.3.1干燥甲苯 7

2.3.2干燥PEG 7

2.3.3酰基化反应 7

2.3.4 PEGDA的纯化 8

2.3.5 PEGDA的冻干及保存 9

2.4 PEGDA光聚合结果 9

第3章 聚乙二醇水凝胶修复大鼠皮肤缺损 10

3.1 实验材料 10

3.1.1实验动物及饲养条件 10

3.1.2实验药品及试剂 10

3.1.3实验器材 10

3.2各实验组注射物的制备 11

3.3动物实验方法 11

3.3.1皮肤损伤模型制作 11

3.3.2实验结果 11

图3.3愈合曲线 12

图3.4添加BMSCs大鼠创面观察 12

第4章 讨论 14

参考文献 16

致 谢 18

第1章 绪论

皮肤作为人体中的最大器官，皮肤软组织受损一直是烧伤外整形科及外科常见的问题，一般多发生于烧伤、外伤、放射线照射后、肿瘤切除后、或某些全身性疾病引起的皮肤溃疡等情况。对于一部分小面积的皮肤全层受损或较浅的创伤皮肤面，可以通过促进残留皮肤附件的干细胞再生，促进临近皮肤组织的上皮细胞迁移而愈合。对于大面积的皮肤全层缺损或重度烧伤创面，临床上常常使用各种皮瓣移植或自体皮片进行修复，但这些方法，多多少少会造成供区新的二次创伤。同时，供皮来源和免疫排斥问题也限制了其有效的应用。目前，临床上进行皮肤移植最好的方法是自体皮移植^[1]，但对大面积皮肤缺损患者而言，通常会面临着自体皮源不足的困扰，即使自体皮源充足，自体皮移植也会对患者造成二次创伤，尤其当皮肤缺损面积较大时，则二次创伤的面积也相应增大。对于这种情况，科学界也研究出不同的皮肤替代产品。组织工程是20世纪80年代正式提出来的一个崭新概念^[2]，组织工程可以为细胞提供生长和分化所需要的微环境,由此来促进组织的形成和再生,从而达到治疗和诊断的效果。随着组织工程技术的发展，组织工程化皮肤成为最先应用于临床治疗的组织工程产品，这些产品虽然可以暂时使创面覆盖，但仍存在一定的免疫排斥反应，且治疗效果不佳。因此如何改进组织工程皮肤，制备功能更加完善的组织工程皮肤，使其更快更好的修复创面，拥有非常重要的价值和前景。

1.1组织工程皮肤支架材料