1. 研究目的与意义（文献综述）

研究背景：水华束丝藻(aphanizomenon flos-aquae) 是一种在世界性富营养化水体中快速繁殖的丝状蓝藻。由于水华束丝藻能分泌束丝藻毒素（aphantoxins）或麻痹性贝类毒素（paralytic shellfish poisons (psps)），是一种毒性极强的神经毒素，对人体健康和环境安全将产生严重的影响。虽然麻痹性贝类毒素能影响细胞的电位门控钠离子通道而发挥它的毒性，然而，其在动物脑的神经调控的生理水平的致毒效应和致毒机制仍然需要探索和理解，截至目前，在这一方面的研究尚未见报道，为此本文乃选此题进行研究。

研究目的：本文以环境污染在水体产生的次生代谢产物水华束丝藻及其分泌的束丝藻毒素为材料，以斑马鱼为受试动物，通过腹腔注射，在毒素处理后的一段时间内的不同时间点，对斑马鱼脑的神经递质受体水平变化进行研究，旨在探索脑神经递质传递变化对该束丝藻毒素的响应，揭示束丝藻水华及束丝藻毒素的神经毒性

意义：通过这一系列的实验研究，在生理水平上对束丝藻毒素的致毒效应和致毒机制有了进一步的揭示，从而进一步研究其在水体环境中所产生的危害及对人体的影响。

2. 研究的基本内容与方案

本文以滇池水华期间（2009）采集分离的水华束丝藻为材料，藻株经实验室培养、细胞内毒素抽提和纯化，毒素含量和成分分析后，通过腹腔注射（5.3 and 7.61mg stxeq/kgbw作为低浓度和高浓度）对斑马鱼进行毒素处理，在染毒后的24小时内的不同时间点（1,3,6,9,12 和 24h）取斑马鱼脑组织和脑垂体，对其色氨酸（amino acid tryptophan，try）、色氨酸羟化酶（tph）、5-羟色氨酸、5-羟色氨酸脱羧酶、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，或serotonin，5-ht）、γ-氨基丁酸（gaba）、5-羟吲哚乙酸（5-hiaa）、谷氨酸脱羧酶（gad）、多巴胺受体（da2r），乙酰胆碱受体（acetycholine receptor, achr）、肾上腺素能受体（apinephrine receptor, b2ar ）递质受体含量/活性、及基因表达变化，旨在揭示斑马鱼脑组织神经传导对束丝藻毒素神经毒性的响应机制。

1）对培育好的斑马鱼进行腹腔注射束丝藻毒素处理。

3. 研究计划与安排

第1周：大量的准备工作，包括查阅资料，立论

第2周：确定研究思路和研究方法的整理，设备的熟悉等，通过对文献的阅读认识，对论文内容进行具体的思考，完成毕业论文开题报告，确定具体的实验，确定实验技术路线，药品配置、材料准备

第3周：进行相应的预实验，确定所需的斑马鱼用量，及相应的毒素注射浓度，对斑马鱼进行毒素处理，在特定时间点取出脑组织后，匀浆测定与神经传导相关的生理指标

4. 参考文献（12篇以上）

[1] 方瑗，张洪，梅元武，等 亚低温持续不同时间对缺血脑组织中氨基酸和单胺类递质含量的影响. 中国神经免疫学和神经病学杂志，2004,11（4）:213-217

[2] rico e.p.，rosemberg d.b.， seibt k.j.，et al. zebrafish neurotransmitter systems as potential pharmacological and toxicological targets. neurotoxicology and teratology ，2011，33： 608–617.

[3]马丽玲，张万山"，沈玲华 大鼠神经肌肉接点i型乙酰胆碱受体密度测定的elisa法.井冈山医专学报，2004,11（6）:65-67