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新型绿色溶剂提取灵芝三萜化合物

课题研究目的和意义

灵芝富含多种活性成分，其药理作用各不相同。三萜类化合物是灵芝的主要活性成分之一，灵芝三萜类化合物主要分布在子实体的外周部分，是灵芝苦味的来源, GLTs可从不同品种的灵芝中分离获得，其含量是鉴定灵芝品质优劣的重要指标之一, 迄今已鉴定的GLTs种类达300多种，GLTs的化学结构较复杂，相对分子质量一般在400～600之间，脂溶性较高，难溶于水，GLTs结构和种类的多样性决定了其药理学和生物学活性的多样性，包括抗氧化、保肝护肝、增强免疫、抗肿瘤、降血脂血糖、防治心血管疾病、缓解哮喘、抗人类免疫缺陷1型病毒（human immunodeficiency virus-1， HIV-1）及HIV-1蛋白酶活性、抑制组胺释放、抑制血小板聚集和防治癫痫等作用^[1]。 目前主要采用有机溶剂回流提取、超声或微波辅助提取、超临界CO2萃取等方法进行提取。但由于灵芝中含有大量甾醇、脂肪等脂溶性化合物，提取过程中难以与三萜分离。因此传统方法将灵芝经有机溶剂提取后，再结合碱提酸化法对三萜组分进一步分离纯化,以得到高含量的灵芝三萜产品。虽然碱提酸化法能够得到较纯的三萜组分，但存在有机溶剂使用量大、操作繁琐、耗时长、效率低的缺点，因此有待寻找一种简单、绿色、高效的替代方法^[2]。近年来，一类新的可持续发展的溶剂-深共晶溶剂（DESs）被开发出来，它具有生物降解性好、操作简单、毒性小等优点,可用此新型绿色溶剂提取灵芝中三萜类化合物，以提高提取质量。^[10]

1.灵芝三萜类化合物的药理功效和应用

1.1 灵芝三萜类化合物的药理功效

(1) 灵芝三萜预防及治疗肝癌的作用

肝癌是世界常见的消化系统恶性肿瘤，其发病率和死亡率呈上升趋势。已有研究表明，灵芝三萜能够增强紫杉醇对乳腺癌细胞增殖的抑制和凋亡的作用，抑制异种移植瘤生长。还有实验^[3]通过研究灵芝三萜对HepG2人肝癌细胞增殖、 凋亡及 Wnt /beta;-catenin 信号通路的影响，探讨灵芝三萜预防及治疗肝癌的作用，结果表明灵芝三萜能够抑制肝癌细胞增殖并诱导凋 亡，其机制可能是通过 Wnt /beta;-catenin 信号通路调节下游靶标c-myc、cyclinD1、caspase-3、caspase-8表达，从而调节细胞周期和细胞凋亡。

(2) 灵芝三萜的抗氧化活性