近平滑假丝酵母来源羰基还原酶的克隆表达与催化合成(S)-1-叔丁氧羰基-3-羟基哌啶的研究开题报告
2020-05-17 21:42:27
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
文 献 综 述 1.1 手性药物及(s)-1-叔丁氧羰基-3-羟基哌啶的性质、应用及市场前景 1.1.1 手性 手性是指一个物体与其镜像不重合的一种性质。
在微观的分子层面上,手性的性质也得以体现:分子的手性通常是分子中的手性碳原子引起,即和一个碳原子相连的四个基团都互不相同。
通常人们使用(rs)、(dl)、(#177;)这些符号对其进行区分和识别。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
1.主要研究内容 本研究以近平滑假丝酵母来源的一种羰基还原酶cprcr为研究对象,探究其在不对称还原制备(s)-1-叔丁氧羰基-3-羟基哌啶中的应用。
通过基因工程手段,构建表达羰基还原酶cprcr,首先初步研究其催化活性,产物光学纯度,在解决上述问题的基础上,构建合理高效的辅酶循环再生系统,寻求提高催化反应效率的方式。
2研究手段 实验首先采取基因工程方式,获取近平滑假丝酵母的基因组,通过pcr扩增出的基因片段,通过酶切连接反应构建重组质粒,并将重组质粒在大肠杆菌中表达,通过sds-page,酶活性鉴定等手段验证该重组菌,在此基础上,继续构建羰基还原酶cprcr和葡萄糖脱氢酶的反应体系,验证辅酶循环体系的作用,并利用这种辅酶循环方式不对称催化还原制备(s)-1-叔丁氧羰基-3-羟基哌啶。
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