1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

研究背景 在全球石油消耗量逐年增加和温室效应日趋严重的今天，当务之急便是寻找一种清洁、可再生的新型能源。

丙酮丁醇梭菌(clostridium acetobutylicum)为革兰氏阳性厌氧产孢细菌，其发酵产物中生物丁醇是重要的可再生生物质能源，是目前被广泛研究及工业生产的生物丁醇梭菌之一。

研究表明，丙丁梭菌细胞能够吸附在特定载体上，大量聚集后分泌胞外聚合介质eps，进而促发菌体细胞以生物膜（biofilm）的形式生存，可明显增加高活性菌体密度，提高细胞耐受性和反应活性，以及增强对环境的适应能力。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

实验方法： 1. 构建敲除质粒 2. 甲基化质粒 3. 电转实验 4. 筛选 #61569;平板加抗性。

先筛选出可以在tm上生长的菌落 #61570;在二型内含子插入位点上游和下游300bp左右的位置分别设计正反两条引物，gc含量为40%左右，长度为20bp左右。

用em平板筛选菌株。