1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文献综述

丙酮丁醇梭菌菌株复壮育种初探

1.1 丙酮-丁醇的性质与用途

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

丙酮-丁醇发酵分为产酸期和产溶剂期2个阶段.发酵初期产生大量的有机酸如乙酸、丁酸等，ph 值迅速下降；当达到一定酸度后，进入产溶剂期，此阶段有机酸被还原，产生大量溶剂，主要为丁醇和丙酮.但是传统的丁醇发酵普遍采用玉米、糖蜜为原料，会产生与人争粮的问题；由于丁醇对菌体的毒害作用，存在严重的产物抑制作用，导致丁醇产量、产率低；使用传统的abe 发酵，丁醇在总溶剂中一般只占60％，比例偏低，加大了后期丁醇回收、分离的成本。

由于丁醇对微生物具有严重的抑制作用, 丙酮丁醇梭菌突变株发生了不同程度的衰退现象。这就要求我们筛选丙酮-丁醇发酵高产突变菌株，获得优良发酵菌株，本课题主要采用热激法，以及刃天青平板富集选育法对丙酮丁醇梭菌突变株进行复壮。对热激的时间，温度和刃天青平板中的铵盐浓度进行优化后，筛选出丙酮-丁醇发酵中生长活力和还原力较高的菌株，对其进行摇瓶发酵。最终筛选出生长活力好、丁醇产量高的丙酮丁醇梭菌突变株。

菌体活力越强，产生的还原性物质越多。反过来讲，产生的还原性物质越多，在一定程度上就代表了菌体的活力越强。刃天青作为一种的氧化还原指示剂，颜色变化灵敏，常用于刃天青还原试验，即根据细胞的还原活力的强弱来反映细胞的代谢活性，在精子生育质量的检测、牛奶卫生质量的检测等领域有广泛的应用。本研究选用刃天青作为指示剂，以菌体使刃天青褪色时间作为关键指标，来衡量菌体的活力，进而选择活性较高的菌株，淘汰退化菌株。