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柠檬苦素抑制LPS诱导的肝脏损伤研究毕业论文

 2021-12-26 13:58:12  

论文总字数:16035字

摘 要

实验目的:本研究通过动物体内实验验证柠檬苦素对LPS诱导的肝脏损伤的抑制作用。

实验方法:首先,对C57BL/6小鼠腹腔注射LPS,建立肝损伤模型;然后,对模型小鼠灌胃给药柠檬苦素进行治疗,观察模型小鼠活动状态的变化,考察体内效果。最后,通过对小鼠血清内ALT/AST活性、肝脏内GSH含量进行检测以及摘除小鼠肝器官进行HE染色考察柠檬苦素对模型小鼠的肝器官是否有治疗作用。

实验结果:通过检测模型小鼠血清中的ALT/AST活性、肝脏内的GSH含量以及通过HE染色实验来观察肝脏组织病理形态,证明了柠檬苦素可抑制LPS诱导的肝脏损伤,并且呈现出浓度依赖性。

关键词:柠檬苦素 LPS 肝脏损伤

Inhibitory effect of Limonin on liver injury induced by LPS

Abstract

Objective:In this study,the inhibitory effect of Limonin on liver injury induced by LPS was verified by animal experiment in vivo.

Methods: First, LPS was injected intraperitoneally into C57BL / 6 mice to establish a liver injury model; then, the mice were intragastrically administered with limonin for treatment. Finally, through the detection of ALT / AST activity in the serum of mice, the amount of GSH in the liver and the removal of liver organs of mice for H amp; E staining experiment to explore whether limonin has effect of treatment for liver organs on model mice.

Results:By detecting ALT / AST activity in serum, GSH amount in liver of mice and H amp; E staining experiment to observe the pathological morphology of liver tissue, it was proved that limonin can inhibit liver injury by LPS in a concentration-dependent manner.

Keywords: Limonin, Lipopolysaccharide (LPS), liver injury

目录

摘要 I

Abstract II

目录 III

第一章 文献综述 1

1.1 柠檬苦素简介 1

1.1.1柠檬苦素的结构与性质 1

1.1.2柠檬苦素的生物活性 1

1.1.3 柠檬苦素的临床应用 4

1.1.4柠檬苦素的研究现状 4

1.2 LPS诱导的肝脏损伤 4

1.2.1 LPS的结构和性质 4

1.3研究内容与意义 5

1.3.1研究内容 5

1.3.2研究意义 5

第二章 材料和方法 7

2.1实验材料 7

2.1.1实验试剂 7

2.1.2 实验仪器 7

2.2 实验方法 8

2.2.1 LPS引起的肝损伤及药物治疗 8

2.2.2血清ALT和AST活性分析 8

2.2.3肝组织GSH含量分析 8

2.2.4肝组织学观察 8

第三章 结果与讨论 10

3.1结果 10

3.1.1柠檬苦素对LPS处理后的小鼠体内ALT和AST活性的影响 10

3.1.2柠檬苦素对LPS处理后的小鼠肝脏内GSH含量的影响 10

3.1.3肝脏组织病理形态 11

3.2讨论 12

第四章 结论与展望 13

4.1 结论 13

4.2 展望 13

参考文献 14

致谢 18

第一章 文献综述

柠檬苦素简介

1.1.1柠檬苦素的结构与性质

柠檬苦素(Limonin)广泛存在于我们的生活中。它是一类结构和功能特殊的化合物。从生源和结构来看,属于含呋喃环的三萜系(Triterpenoids)(结构见图1),实际上是三萜的降四碳产物。它具有高度活性,包括柠檬苦素糖苷和柠檬苦素糖苷配体在内的一系列化合物。属于芸香科植物的柚、柑、桔、橙等水果的果核及种皮中富含柠檬苦素,尤其在柑橘的种子中富集[1]。柠檬苦素是植物中重要的次生代谢产物,具有独特的口味,可作药用和食用。柠檬苦素类化合物在水中的溶解度和其本身的酸碱性有关,在不同的溶剂中其溶解度有明显的差异。易溶于烃类有机溶剂,在甲醇、乙醇中溶解度较大。在水溶液中中性类柠檬苦素化合物的溶解度较低,但是酸性类柠檬苦素化合物的溶解度较好,并且很少产生苦味[2]。就目前而言,已经发现的柠檬苦素化合物有几百种,存在形式主要为柠檬苦素类似物苷元和柠檬苦素类似物糖苷。现已从柑橘属中分离出的苷元和糖苷分别为38和20种[3],并且它们在结构和功能都比较相似,引起苦味的主要原因是苷元的存在。柠檬苦素的化学性质极不稳定,很容易发生结构变化而失去活性。因此在生产加工过程中需要严格控制条件。

图 1 柠檬苦素结构

1.1.2柠檬苦素的生物活性

1、抗炎、镇痛活性

为了研究柠檬苦素的抗炎、镇痛效果,相关研究使用炎症因子诱导大鼠发生足肿胀反应,再给予柠檬苦素类似物进行治疗发现能够明显降低其舔足次数,表明柠檬苦素类似物具有良好的抗炎作用。YANG等[4]研究发现,柠檬苦素类化合物的抗炎活性以及镇痛活性均强于常规的镇痛抗炎药物。李敬芳等[5]对小鼠体内植入棉球后导致小鼠产生肉芽肿和扭体反应后,使用柠檬苦素对小鼠进行治疗,发现小鼠扭体反应次数有所下降以及肉芽肿症状有所改善,表明了柠檬苦素具有良好的镇痛消炎作用。人们一直在对柠檬苦素的抗炎、镇痛机制进行积极的探索,目前有所发现。例如,在体内的炎症反应中核转录因子NF-κB的产生会导致炎症的发生和进一步恶化,它在炎症反应当中起到主导作用,这种炎症因子可诱导NF-κB p56蛋白的激活,而NF-κB p56蛋白的激活可导致细胞再生受损[6]。越来越多的研究表明柠檬苦素可以显著抑制炎症部位的NF-κB转录活性,从根源上减少NF-κB p56蛋白的产生,进而起到抗炎、镇痛的治疗效果。柠檬苦素类化合物由于其在抗炎镇痛方面表现出良好的生物活性,在治疗炎症疾病方面引起了人们的广泛关注。

2、护肝活性

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