摘 要

目的：建立LC-MS/MS方法测定大鼠血浆中TAT101的含量

方法：色谱柱：ACE柱（50 mm2.1mm，5 µm）；流动相：A 相：0.1%甲酸水溶液；B相：0.1%甲酸乙腈水溶液；80%A：20%B，流速：0.3mL/min；MS源：ESI，Positive；TAT101 m/z：587.200/500.200；TAT107（IS） m/z：691.300/439.100。

结果：

1. TAT101在5.00~5000 ng/mL浓度范围内，药物浓度与药物/内标峰面积比值符合线性回归方程。
2. TAT101精密度均以批内和批间测定的相对标准偏差表示，结果显示批间和批内精密度和准确度均符合要求。

结论：本方法能较好测定TAT101的含量，专属性强，灵敏度高，稳定性好，结果准确。

关键词：TAT101 LC-MS/MS 大鼠血浆

Preclinical study on antimalarial activity of a new antimalarial drug

ABSTRACT

Objective：To develop a liquid chromatography with tandem mass spectrometry (LC-MS/MS)method for the determination of TAT101 in rat plasma.

Method:chromatographic columns：ACE columns;mobile phase:Phase A:0.1% formic acid solution;Phase B:0.1%formic acid acetonrile. solution;80%A⁚20%B;Velocity:0.3mL/min;MS source:ESI,positive;TAT101 m/z：587.200/500.200;TAT107(IS) m/z：691.300/439.100.

Result:

1. The method was proved to be linear in the range of 5.00~5000 ng/mL.
2. The precision of TAT101 is represented by RSD of the intra- and inter-assay measurements. The results show that both intra- and intra-assay precision and accuracy meet the requirements.

Conclusion:this method is specific,precise,accurate and sensitive to be suitable for concentration of TAT101.

Keywords：TAT101;LC-MS/MS;plasma

目 录

摘要………………………………………………………………………………………I

ABSTRACT……………………………………………………………………………Ⅱ

第一章 文献综述………………………………………………………………………1

1.1 前言…………………………………………………………………………………1

1.2 液质联用技术的概述………………………………………………………………1

1.2.1液质联用技术的原理…………………………………………………………1

1.2.2液质联用系统的分类…………………………………………………………1

1.2.3液质联用技术的发展…………………………………………………………2

1.3液质联用技术的应用………………………………………………………………2

1.3.1药物代谢产物鉴定……………………………………………………………3

1.3.2生物样品定量分析……………………………………………………………3

1.4新药临床前研究……………………………………………………………………3

1.4.1方法学建立与验证……………………………………………………………3

1.4.2药代动力学研究………………………………………………………………3

1.5临床前药动学实验设计的基本原则………………………………………………4

1.5.1 实验对象的选择………………………………………………………………4

1.5.2 实验样品的要求………………………………………………………………4

1.5.3 给药途径和剂量选择…………………………………………………………4

1.5.4 生物样品定量分析指导原则…………………………………………………4

1.5.5 药动学参数的估算……………………………………………………………4

第二章 TAT101在大鼠血浆中的方法学验证概述……………………………5

2.1 试验目的……………………………………………………………………………5

2.2 试验日期……………………………………………………………………………5

2.3 研究遵循的GLP法规性文件………………………………………………………5

第三章 研究内容和实验实施………………………………………………………6

3.1 实验材料……………………………………………………………………………6

3.1.1 标准品…………………………………………………………………………6

3.1.2 试剂……………………………………………………………………………6

3.1.3 仪器…………………………………………………………………………6

3.2 实验方法…………………………………………………………………………7

3.2.1 试剂配制……………………………………………………………………7

3.2.2 样品制备……………………………………………………………………8

3.2.3 血浆样品的处理……………………………………………………………9

3.2.4 色谱和质谱条件……………………………………………………………9

3.2.5 方法学验证…………………………………………………………………10

3.3 结果………………………………………………………………………………12

3.3.1 标准曲线、线性范围和最低定量限………………………………………12

3.3.2 精密度和准确度……………………………………………………………15

第四章 结论与展望

4.1 结论……………………………………………………………………………17

4.2 全文总结………………………………………………………………………17

4.3 展望……………………………………………………………………………18

参考文献………………………………………………………………………………19

致谢……………………………………………………………………………………21

附表和图