竹节香附素A对诱导结肠癌细胞SW480凋亡的实验研究

竹节香附又称两头尖，为毛茛科银莲花属植物多被银莲花（Anemone raddeana Regel）的干燥根茎^[1]。20 世纪 80 年代以来先后从竹节香附中分离并鉴定出多种化学成分，主要是三萜皂苷类^[2]，其中一种三帖皂苷#8212;#8212;竹节香附素 A（raddeanin A）具有较强的抗肿瘤作用^[3]，目前发现竹节香附素 A 对诸如肝癌、肺癌、胃癌等多种恶性肿瘤的生长有明显的抑制作用^[4-6]。而关于竹节香附素A对结肠癌细胞的抑制研究^[7]还不够透彻，因此本实验旨在通过体外细胞实验来探讨竹节香附素A对结肠癌细胞SW480增殖抑制的影响。

1、结肠癌

结肠癌是常见的发生于结肠部位的消化道恶性肿瘤，好发于直肠与乙状结肠交界处，以40～50岁年龄组发病率最高，男女性别之比为2～3∶1，发病率居胃肠道肿瘤的第3 位，在我国发病率呈逐年增长的趋势^[8-9]。因此，开发治疗结肠癌的药物迫在眉睫。

1.1结肠癌的形成机制

1990 年，Fearon 等在总结了结直肠癌发病机制研究成果的基础上提出了结直肠癌从正常黏膜上皮 - 腺瘤 - 腺癌的组织发生过程中原癌基因和抑癌基因渐次改变的经典分子模型。

在结肠癌的发生与发展过程中，原癌基因的激活起着重要作用^[10]。目前，与结肠癌有关的原癌基因有蛋白质激酶类原癌基因、ras 家族、核癌基因和生长因子受体(如表皮生长因子受体家族和集落刺激因子受体)类原癌基因^[11]。有报道称可通过激活 k-ras 来有选择的杀伤结肠癌细胞^[12]。

抑癌基因也称抗癌基因，是一种在正常细胞中存在的基因，在被激活的情况下具有抑制细胞增殖的作用，但在一定情况下被抑制或丢失后可减弱甚至消除抑癌的作用。目前研究表明与结肠癌有关的抑癌基因包括:P53、结肠腺瘤性息肉病基因 、NGX6等。研究证实，APC 基因与家族性多发性息肉病和大多数散发性结肠癌的早期阶段或腺瘤密切相关^[13]。

现研究表明,结肠组织癌变分子机制主要包括:①微卫星不稳定^[14];②DNA 损伤修复相关基因功能丧失,如错配修复基因突变导致细胞遗传不稳定或致肿瘤易感性增加;③癌基因激活、过度表达;④抑癌基因突变、丢失;⑤端粒酶过度表达;⑥信号转导调控紊乱;⑦凋亡机制障碍等^[15-18]。

1.2结肠癌的药物治疗

随着生物技术的发展，针对结肠癌的基因治疗已有多种方法，但将基因治疗结肠癌用于临床仍有许多障碍和不安全因素，因此结肠癌药物治疗的研究进展迅速。目前在研究的治疗结肠癌的药物有氟尿嘧啶类药、拓扑异构酶抑制剂、DNA 损伤剂、环氧合酶（COX）2 选择性抑制剂塞来昔布^[19]。